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点突变半年了还没出来。。求助。。已有4人参与
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要突变启动子上一个位点，试了酶切连接，NEB的HiFi Assembly，定点突变，用过TOP10F'和NEB 10ß做转化，每次不是不长就是WT。。 比如这次，俩片断PCR完了跑胶看没问题，俩片断和质粒酶切完胶回收也都ok，然后连接完长出来还是WT。。想不明白这WT是哪儿来的，按说体系里应该没有了啊。。 求各位大神指点迷津。。 |
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3楼2018-01-30 17:32:56
4楼2018-01-30 17:35:27