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心碎

新虫 (小有名气)

[求助] 关于半胱氨酸上巯基与双键分子的click反应 已有2人参与

各位大侠,求助,实验做的快被老板喷死了,看到的多提建议,多谢!
最近在做聚合物的修饰,共聚肽中含有巯基保护的半胱氨酸,想要脱掉保护基,得到的巯基与含双键分子进行click偶联,脱保护是在DMF中进行的,然后旋蒸浓缩后沉淀在乙醚中,但是在脱掉保护基处理的过程中巯基可能会产生交联,如何避免呢?
后续的click反应过程,加入双键分子为巯基的1.5当量,加入DMPA进行紫外光照24h,进行自由基反应,得到的修饰率较低,如何提高修饰率呢,希望虫友们帮忙!感激感激,笔芯
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实验顺利,其他都是浮云
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qilin112

新虫 (著名写手)

双键分子是什么,
为什么要照24h,紫外光强不够么
2楼2018-01-28 14:09:15
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心碎

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by qilin112 at 2018-01-28 14:09:15
双键分子是什么,
为什么要照24h,紫外光强不够么

双键分子是烯丙胺与葡萄糖内酯反应后的产物,光强大约180毫瓦左右,光照24小时,是担心没反应完
实验顺利,其他都是浮云
3楼2018-01-28 19:14:16
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qilin112

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
心碎: 金币+20, 有帮助 2018-01-28 20:55:18
引用回帖:
3楼: Originally posted by 心碎 at 2018-01-28 19:14:16
双键分子是烯丙胺与葡萄糖内酯反应后的产物,光强大约180毫瓦左右,光照24小时,是担心没反应完...

我做的click反应物要比你简单很多,所以不太肯定你的问题出在哪。
但是我失败时反应都是巯基化合物变质导致的。
不知道你用什么方法确定巯基化合物的纯度,是否交联。
如果担心氧化交联,是不是可以加一个还原解交联的步骤。
4楼2018-01-28 20:20:05
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心碎

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by qilin112 at 2018-01-28 20:20:05
我做的click反应物要比你简单很多,所以不太肯定你的问题出在哪。
但是我失败时反应都是巯基化合物变质导致的。
不知道你用什么方法确定巯基化合物的纯度,是否交联。
如果担心氧化交联,是不是可以加一个还原解 ...

谢谢,通常的还原解交联是加入DTT,但是我担心DTT含有巯基,会消耗我的双键分子,我有在click体系中加入过DMPP(二甲基苯基磷),但是效果不明显,很抓狂
实验顺利,其他都是浮云
5楼2018-01-28 20:42:34
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wangjin1981

金虫 (正式写手)

念念不忘,必有回响

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
心碎: 金币+20, 有帮助 2018-02-27 15:19:31
引用回帖:
5楼: Originally posted by 心碎 at 2018-01-28 20:42:34
谢谢,通常的还原解交联是加入DTT,但是我担心DTT含有巯基,会消耗我的双键分子,我有在click体系中加入过DMPP(二甲基苯基磷),但是效果不明显,很抓狂...

如果确定是多肽中的巯基交联,除了控制浓度之外,可以加入TCEP,巯基就不要加了,另,尽可能保持体系偏酸性,除了在加成时
to be or not to be
6楼2018-01-29 10:41:12
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心碎

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by wangjin1981 at 2018-01-29 10:41:12
如果确定是多肽中的巯基交联,除了控制浓度之外,可以加入TCEP,巯基就不要加了,另,尽可能保持体系偏酸性,除了在加成时...

好的,我想问一下保持体系偏酸的原因是什么呢,谢谢
实验顺利,其他都是浮云
7楼2018-02-27 15:20:51
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程凯风

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 心碎 at 2018-02-27 15:20:51
好的,我想问一下保持体系偏酸的原因是什么呢,谢谢...

巯基在弱碱性条件下,很快就会变成二硫键。酸性条件下稳定许多。

发自小木虫Android客户端
8楼2018-03-02 21:23:47
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执着的w

新虫 (初入文坛)

你用什么作半胱氨酸的溶剂,DMF吗?我试了怎么溶解的不好,点击化学实验不成功,有没有什么好的良溶剂?

发自小木虫Android客户端
9楼2018-03-18 23:47:54
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karay

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by wangjin1981 at 2018-01-29 10:41:12
如果确定是多肽中的巯基交联,除了控制浓度之外,可以加入TCEP,巯基就不要加了,另,尽可能保持体系偏酸性,除了在加成时...

请问这个反应需要多久的时间呀

发自小木虫Android客户端
10楼2018-07-12 14:54:54
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