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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » His标签蛋白纯化不成功
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moves757

禁虫 (初入文坛)
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1楼 2018-01-23 11:53:25
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的蛋白听起来不融，比较难搞。his-tag提纯也不容易，沉淀上柱的流出物有杂带很普遍。
没有特别容易的解决方案，减少IPTG，不断摸索条件，换菌株，换成酵母表达等等
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Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
2楼2018-01-23 23:59:00
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moves757

禁虫 (初入文坛)
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3楼2018-01-26 12:17:36
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)
可能要复性。试试purimag的Ni纯化磁珠

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4楼2018-01-26 14:24:22
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zyb6401

新虫 (初入文坛)
首先蛋白不溶，有可能是溶液的PH值设置有问题，应与等电点保持0.5～3的差值，还有如果不溶就要考虑加尿素或盐酸胍助溶。

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5楼2018-01-26 17:21:22
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陈阿静

新虫 (初入文坛)
降低温度，和诱导剂的

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6楼2018-04-16 14:30:53
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