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yuevis

铜虫 (小有名气)

[交流] taq加尾，TA连接 已有1人参与

请问我用taq酶对胶回收的片段进行加尾，再与T载体相连，加尾后直接取体系里的反应液与载体相连还是要对加尾后的体系进行纯化再相连?

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1楼 2018-01-16 22:09:39
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渊博震天

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加尾后用pcr产物纯化试剂盒纯化后再连

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yuevis
2楼2018-01-16 22:28:17
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yuevis

铜虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-01-16 22:28:17
加尾后用pcr产物纯化试剂盒纯化后再连

请问一般加尾体系是多大?

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3楼2018-01-16 22:35:05
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渊博震天

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3楼: Originally posted by yuevis at 2018-01-16 22:35:05
请问一般加尾体系是多大?
...

根据T载体试剂盒要求来就行

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4楼2018-01-16 22:36:29
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yuevis

铜虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-01-16 22:36:29
根据T载体试剂盒要求来就行
...

我买的T载体试剂盒是说取1到2微升反应液加入连接体系中（10微升）。会不会由于加尾体系太少经过纯化都损失了或者浓度很低?

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5楼2018-01-16 22:41:14
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渊博震天

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5楼: Originally posted by yuevis at 2018-01-16 22:41:14
我买的T载体试剂盒是说取1到2微升反应液加入连接体系中（10微升）。会不会由于加尾体系太少经过纯化都损失了或者浓度很低?
...

T-A克隆是有比例的，同时你纯化完后可以测一下浓度，之后按照试剂盒推荐比例进行连接。

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6楼2018-01-16 22:43:37
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