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lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人

[交流] 求助:革兰氏阳性菌感受态如何制备?

各位大侠,链球菌(革兰氏阳性菌),而且还有荚膜,感受态如何制备呀?原生之体转化效果怎样?有没有菌体转化的方案呀?
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细推物理须行乐。
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rszhang

铁杆木虫 (正式写手)

枯草芽孢杆菌如何化学转化?
8楼2009-03-06 20:56:21
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wildboy

★ ★
sxdxrhyy(金币+2,VIP+0):谢谢参与讨论~欢迎常来~ 3-6 09:15
1.准备工作:配制1mol/L的氯化钙并将其过滤和LB培养基;高压纯甘油和50毫升的离心管。
2.制备感受态细胞:
(1)将保存的相应的感受态细胞的菌液画板与37度培养箱中培养十二小时。
(2)挑単菌落于新鲜的LB培养基中,于37度摇床中摇9-10小时,注意不要摇过!
(3)按1%取上述菌液于新鲜的LB培养基中,于37度摇床中摇2-3小时至OD达0.3-0.6.
(4)将50mL离心管和菌液冰裕30min后将菌液加入离心管中。
(5)于4000rpm离心15min,弃上清。
(6)按初始培养液的10%的冰浴的氯化钙重悬沉淀,冰浴30min.
(7)于4000rpm离心15min,弃上清。
(8)按初始培养液的4%的冰浴的氯化钙重悬沉淀并加甘油至10%,分装于1.5mLep管中,每管100uL。注意分装时要在冰上操作!
from:http://www.biomsn.com/html/97/t-11397.html
3楼2009-03-05 14:37:48
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lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人

革兰氏阳性菌 和大肠即阴性一样吗?有些置疑
细推物理须行乐。
4楼2009-03-05 22:01:37
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charon1982

铁杆木虫 (著名写手)

我也想知道,能否提供一下,一般阳性菌电转吧
帮助虫友,提升自己
5楼2009-03-05 22:54:36
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