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lauren180木虫 (著名写手)
小木虫挖井人
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求助:革兰氏阳性菌感受态如何制备?
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| 各位大侠,链球菌(革兰氏阳性菌),而且还有荚膜,感受态如何制备呀?原生之体转化效果怎样?有没有菌体转化的方案呀? |
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lauren180
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4楼2009-03-05 22:01:37
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sxdxrhyy(金币+2,VIP+0):谢谢参与讨论~欢迎常来~ 3-6 09:15
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1.准备工作:配制1mol/L的氯化钙并将其过滤和LB培养基;高压纯甘油和50毫升的离心管。 2.制备感受态细胞: (1)将保存的相应的感受态细胞的菌液画板与37度培养箱中培养十二小时。 (2)挑単菌落于新鲜的LB培养基中,于37度摇床中摇9-10小时,注意不要摇过! (3)按1%取上述菌液于新鲜的LB培养基中,于37度摇床中摇2-3小时至OD达0.3-0.6. (4)将50mL离心管和菌液冰裕30min后将菌液加入离心管中。 (5)于4000rpm离心15min,弃上清。 (6)按初始培养液的10%的冰浴的氯化钙重悬沉淀,冰浴30min. (7)于4000rpm离心15min,弃上清。 (8)按初始培养液的4%的冰浴的氯化钙重悬沉淀并加甘油至10%,分装于1.5mLep管中,每管100uL。注意分装时要在冰上操作! from:http://www.biomsn.com/html/97/t-11397.html |
3楼2009-03-05 14:37:48
charon1982
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5楼2009-03-05 22:54:36
lauren180
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6楼2009-03-06 13:47:02













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