24小时热门版块排行榜    

查看: 1811  |  回复: 11
当前主题已经存档。

longfeng

金虫 (小有名气)

[交流] 求助:提质粒为什么总是出现好几条带

各位大侠,我最近提质粒总是跑出两三条带,应该是螺旋和超螺旋条带。但是影响酶切,影响酶切检测。
请问怎么解决这个问题?不知各位大侠有没有好的解决方案?
谢谢!
xueshui0393@126.com
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

酶切后就剩一条了,除非切开的片段很大……怎么会影响酶切………………
2楼2009-03-01 21:20:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

不不影响酶切
会当凌绝顶,一览众山小
3楼2009-03-02 03:29:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lufuhao

木虫 (著名写手)

极品木虫

★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):感谢应助!加油! 5-27 16:15
那可以这样试一下
1。把你的感受态与转化的感受态分别涂板,这样看一下你的感受态又没有问题!
2。如果不是用的试剂盒,那看一下你的操作方法有没有错误,或者,干脆,让你做过此实验的同学帮帮忙,帮你提一下,再看看效果!(我小抽质粒时,加Solution II后是要很小心的,还有最好不要直接用枪头特别是小枪头吹吸质粒溶液,弹匀即可)
3。我不知道你所说的两三条带是什么样子?最好把图贴上来,一般如果是螺旋、线性或开环的话,我是说在一般情况下,一般只有一条带比较亮而且为之相对比较集中
4。酶切。确定酶切体系没有错误的前提下,用只有一个酶切为点的单酶切,跑电泳看一下,一般应该只出现一条带,否则,要仔细考虑考虑另外一条带是怎么来的!
将心比心
4楼2009-03-02 11:06:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小猫三两只

金虫 (正式写手)

提的质粒一般都会有2-3条带,DNA没有变化,只是状态有所不同,酶切后都是一样的,不会影响酶切的
5楼2009-03-02 11:18:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longfeng

金虫 (小有名气)

提质粒的时候出现两三条条带可能由于摇晃的力度太大,会出现超螺旋、螺旋和开环三种状态的,不过不会太影响酶切效果,建议你在做酶切之前先把质粒变性一下,这样会比较好。
6楼2009-05-27 16:00:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hihoney

铁杆木虫 (职业作家)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 小猫三两只 at 2009-3-2 11:18:
提的质粒一般都会有2-3条带,DNA没有变化,只是状态有所不同,酶切后都是一样的,不会影响酶切的

同意这只猫的说法。
7楼2009-05-27 16:16:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longxiange520

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
提质粒2-3条带很正常的啊,我有次提取的只有一条带被老板怀疑是不是提质粒的过程中出现什么问题了呢!
8楼2009-05-27 16:30:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

suenmomo

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
酶切完全的话不应该的
除非两条带的分子量相差太大
9楼2009-05-27 16:59:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沐风望野

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
提出两三条带一般都是很正常的,不过注意在加入溶液2和3之后的混匀力度可以稍微改善这个情况,也可以使目的质粒的亮度增加
10楼2009-05-27 18:54:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 longfeng 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见