24小时热门版块排行榜    

查看: 2048  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

sunnyhln

新虫 (正式写手)

[交流] 求助 已有4人参与

如果以植物组DNA为模版,通过普通PCR扩增克隆我需要的基因,需要模版DNA的浓度需要在什么范围?

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王平阳

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by sunnyhln at 2017-12-18 16:36:53
我是提取的莲雾果实的基因组DNA,每次都是含量特别低,最高的一次浓度是16ng/ul,跑电泳看不到条带,是不是浓度太低的原因?是否可以作为模版进行基因克隆呢?
...

你这么个浓度,基本可以看作没提出来,跑电泳不可能有条带的,做PCR模板也不行,再想办法提取高质量的基因组吧
没有做不到,只有想不到!
8楼2017-12-18 17:01:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

lenaimiao

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1到2ul,10ng/ul到100pg/ul应该都可以,体积根据你的反应体系变化。第一次浓度尽量高点

发自小木虫Android客户端
2楼2017-12-18 10:36:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunnyhln

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lenaimiao at 2017-12-18 10:36:47
1到2ul,10ng/ul到100pg/ul应该都可以,体积根据你的反应体系变化。第一次浓度尽量高点

我每次提取的植物基因组DNA大约都是10ng/ul,跑琼脂糖凝胶电泳毫无条带,是不是浓度太低的原因啊?如果以它为模版克隆基因,是不是太低了浓度?不用几百ng/ul嘛?

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-12-18 10:57:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bbass533

禁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

4楼2017-12-18 12:50:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +4 scalable 2026-08-24 4/200 2026-08-24 16:22 by truewz
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +16 koalala 2026-08-24 18/900 2026-08-24 15:43 by zhuzg0628
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 我面上完蛋了 +8 且听虎啸 2026-08-20 9/450 2026-08-24 13:52 by zzuzxg
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 什么时候开奖? +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
请填处理意见