应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 原核表达
51/1返回列表
查看: 595  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wanghuan2017

新虫 (初入文坛)

[交流] 原核表达 已有2人参与

最近在做原核表达，His标签，图中1号泳道是用IPTG诱导的没有添加目的基因的菌，2号是未诱导的目的菌A，3号是用IPTG诱导的目的菌A，4号是未诱导的目的菌B，5号是诱导的目的菌B，6号是诱导的阳性对照。和对照相比，3,5明显有一条很粗的带，但是western检测的时候只杂出来了阳性对照，自己的没有杂出来，是蛋白没有诱导出来吗？那考染的那两条很粗的带是什么？还是说蛋白表达了但是his标签丢失了？求各位大神给点意见，谢谢。

原核表达


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-12-16 15:57:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanghuan2017

新虫 (初入文坛)
目的蛋白的大小是60多kDa

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2017-12-16 15:58:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小牧童嘻嘻

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是表达了，western做的有问题吗？哪一步都会影响结果
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

wanghuan2017
如果不知道未来是什么样的，勇敢向前走就行了
3楼2017-12-29 09:50:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanghuan2017

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小牧童嘻嘻 at 2017-12-29 09:50:21
是表达了，western做的有问题吗？哪一步都会影响结果

western没有问题，阳性对照杂出来了是黑色的条带，换上PET32a之后仍然是染色有带，杂交时显影时间长一点会有一点灰色的带
赞一下 回复此楼
4楼2018-01-22 17:14:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Cuic_Qing

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问 我也是做原核表达 IPTG诱导 应该用R-250还是G-250考染呢 我只通过条带深浅看表达情况 不测蛋白浓度 考染直接完了脱色 就结束了 应该选用哪个呢

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
5楼2018-03-26 17:25:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wanghuan2017 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工调剂 +8 A-哆啦Z梦 2026-03-23 13/650 2026-03-24 21:05 by greychen00
[考研] 求调剂323材料与化工 +3 1124361 2026-03-24 3/150 2026-03-24 20:24 by peike
[考研] 求材料，环境专业调剂 +3 18567500178 2026-03-18 3/150 2026-03-23 23:50 by 热情沙漠
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 341求调剂(一志愿湖南大学070300) +5 番茄头--- 2026-03-22 6/300 2026-03-23 23:45 by Txy@872106
[考研] 336求调剂 +4 收到VS 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:02 by macy2011
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂 +5 jiajunX 2026-03-22 5/250 2026-03-23 18:07 by YMU施老师
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 316求调剂 +7 梁茜雯 2026-03-19 7/350 2026-03-23 16:21 by lingjue
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 4/200 2026-03-22 10:25 by QGZDSYS
[考研] 一志愿华南师大 070300（化学）304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 求调剂一志愿南京航空航天大学289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-20 21:34 by JourneyLucky
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 261求B区调剂，科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭