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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 重金请教黄酮单体分离的牛人。
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yangsitao

铁虫 (正式写手)

[交流] 重金请教黄酮单体分离的牛人。

小弟我正在分离黄酮单体，现在已经得到含量为60%以上的总黄酮，可不知怎么分离。该总黄酮水溶性还可以，大概有六到七个化合物。而且其中有几个化合物的在聚酰胺薄层上挨得挺近的，开始小弟用聚酰胺柱子来分不知是什么原因就是分不开，我用的是水和甲醇梯度洗可我开始用水溶液上样就把所以的东西给洗了下来一个都没分开。好郁闷，老板等着要结果。我是一筹莫展，想请教各位虫虫一下几个问题：1，聚酰胺柱该怎么上样？（我是直接水上样）
              2，上样时我的物料比（黄酮的量和聚酰胺的量)和径高比，流速应该控制在多少？
              3，我要是现在改用硅胶来分我用该怎么分？
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卖身，不卖肉。
1楼 2009-02-28 01:30:52
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

clubakqj

金虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
yangsitao(金币+2,VIP+0):你能告诉我我该怎么个上样，具体点，比如柱子要多高，上样浓度应该控制在多少？谢谢你的帮助。 2-28 09:43
xy4585618(金币+1,VIP+0):谢谢参与 3-9 13:38
yangsitao(金币+1,VIP+0):谢谢帮助 3-15 21:57
水溶性很好肯定是黄酮甙，用Sephadex LH-20很好分离黄酮甙，直接用甲醇作流动相，还不行的话可以用甲醇水试试。
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2楼2009-02-28 08:00:11
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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢回复！ 3-23 00:39
看这么人帮你，我这里就不重复了。我就补充一点：不要想着一次性上柱就能出单体，那样的情况很少。除非你是分大黄素、大黄酚或者芦丁什么的... 祝你成功。
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22楼2009-03-22 21:47:09
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普通回帖

chnping0829

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
yangsitao(金币+2,VIP+0):想要葡聚糖分离的具体条件，如何上样，如何洗脱。能诶点具体的操作方法吗？ 2-28 12:29
xy4585618(金币+1,VIP+0):谢谢参与 3-9 13:39
yangsitao(金币+1,VIP+0):谢谢你的帮助 3-15 21:58
不要用硅胶了，样品损失太大，sephadex LH-20用95%乙醇洗脱也行
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3楼2009-02-28 11:43:14
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kaikaifeng

荣誉版主 (文坛精英)

学术纯属狗屁~
★ ★ ★ ★ ★
yangsitao(金币+1,VIP+0):谢谢你的帮助 2-28 18:41
yangsitao(金币+2,VIP+0):谢谢你的帮助 3-2 10:33
xy4585618(金币+1,VIP+0):谢谢参与 3-9 13:39
yangsitao(金币+1,VIP+0):谢谢你的帮助 3-15 21:58
引用回帖:
Originally posted by clubakqj at 2009-2-28 08:00:
水溶性很好肯定是黄酮甙，用Sephadex LH-20很好分离黄酮甙，直接用甲醇作流动相，还不行的话可以用甲醇水试试。

Sephadex LH-20也可以用梯度,有反相的作用~
不过不知道分黄酮会如何,没有试过~
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不扯淡，不忽悠，不懂不要装懂；不折腾，不闹腾，睁眼不说瞎话；凭良心做人，以品德服人。
4楼2009-02-28 12:55:24
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鑫雨918

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
yangsitao(金币+1,VIP+0):谢谢帮助 3-6 00:14
xy4585618(金币+1,VIP+0):谢谢参与 3-9 13:39
yangsitao(金币+1,VIP+0):谢谢你的帮助 3-15 21:58
应该先萃取在上柱：乙酸乙酯和正丁醇
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5楼2009-02-28 13:29:11
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liyun8083

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
yangsitao(金币+2,VIP+0):谢谢帮助 3-1 01:38
yangsitao(金币+1,VIP+0):谢谢帮助 3-15 21:58
不知是从那种药用植物中分离的？将总黄酮溶解用树脂试试。硅胶柱就不要用了！
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好事多磨，坚持走下去！Happy Sea!
6楼2009-02-28 13:32:17
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clubakqj

金虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
yangsitao(金币+3,VIP+0):谢谢你的帮助 2-28 18:40
yangsitao(金币+3,VIP+0):小弟我先给上3个金币，希望你能再给我提供下帮助。我的QQ号是331033474，密码提示答案：杨四涛想在线和你探讨下。 2-28 22:09
xy4585618(金币+1,VIP+0):谢谢参与 3-9 13:39
你可以先取极少量（比如百分之一），然后用一根小柱子或者就用注射器小试一下看看分离度如何。这个工作很快就能完成。找到好的分离条件了再全部分离。
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7楼2009-02-28 16:22:05
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yangsitao

铁虫 (正式写手)
希望各位虫虫能无私的帮助，多多指教啊
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卖身，不卖肉。
8楼2009-02-28 22:05:39
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clubakqj

金虫 (著名写手)
谢谢你的金币。我想说的都说完了，你做就是了。不好意思我不用QQ。
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9楼2009-02-28 23:10:03
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cynthia594

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 3-2 21:46
xy4585618(金币+1,VIP+0):谢谢参与 3-9 13:40
yangsitao(金币+1,VIP+0):谢谢你的帮助 3-15 21:59
我现在做的课题主要也是黄酮的分离，你的情况来看，应该主要是黄酮苷，极性偏大的部分。薄层上挨得很近的话，说明极性的大小很相近，如果分子量相差不大的话，葡聚糖凝胶的分子筛原理分离效果也不一定会好。不过你可以试试。聚酰胺柱的洗脱系统的话，推荐你试试氯仿：甲醇：水或乙酸乙酯：甲醇：水，看看效果如何。如果你的样品量比较大，可以考虑硅胶柱，当然前提是硅胶薄层板上要能看到比较好的分离效果。
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10楼2009-03-02 19:24:59
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