应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 前辈们，这个情况遇到过么？
141/2返回列表12下一页
查看: 1373  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

就是柚子啊！

新虫 (正式写手)

[求助] 前辈们，这个情况遇到过么？ 已有2人参与

从提质粒，反转录，pcr，连T，转化，涂板，挑菌，菌落pcr，摇菌，提质粒，每个过程都有条带，也都在目的条带区域。提质粒测序回来，却没有目的条带，非常非常不解，而且做了两次，都没有目的物，两个多月，一点成就都没有！跪求大神帮分析

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-12-15 08:51:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

arthrospira

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
质粒测序前做了简单的验证吗？比如酶切，是否有目标条带？
赞一下 回复此楼
2楼2017-12-15 09:26:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

就是柚子啊！

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by arthrospira at 2017-12-15 09:26:27
质粒测序前做了简单的验证吗？比如酶切，是否有目标条带？

我们是这样，先去质粒测序，回来看看有没有目的序列，有的话就酶切，没有的话就重做。我就是第一次测序结果没有目的序列，然后又做这次，又没有。所以真心不知道哪有问题

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2017-12-15 09:52:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

长岛冰茶yo

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是目的条带根本就不在质粒上呢
赞一下 回复此楼
4楼2017-12-15 10:01:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

就是柚子啊！

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 长岛冰茶yo at 2017-12-15 10:01:14
可能是目的条带根本就不在质粒上呢

对√测序结果就是这样的。难道是连T没连上？转化后都是有菌落，菌落pcr也是有条带的啊！！！

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2017-12-15 10:27:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

含笑少年。

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-12-16 09:57:18
先酶切，确定连进去了再测序。另外，如果你的片段比较长，建议连接的时候用pcr仪控温，16度过夜连接。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
6楼2017-12-15 10:51:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cosmos796

禁虫 (职业作家)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-12-16 09:59:18
本帖内容被屏蔽
7楼2017-12-15 12:29:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

arthrospira

金虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-12-16 09:59:36
引用回帖:
3楼: Originally posted by 就是柚子啊！ at 2017-12-15 09:52:45
我们是这样，先去质粒测序，回来看看有没有目的序列，有的话就酶切，没有的话就重做。我就是第一次测序结果没有目的序列，然后又做这次，又没有。所以真心不知道哪有问题
...

感觉这么做程序不对，测序可能当天不能知道结果，等待的时间长，还要花钱测序；直接酶切，跑个胶就能看结果。
赞一下 回复此楼
8楼2017-12-15 13:25:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

arthrospira

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

实际上每一步实验结果都要验证，确认成功才做下一步。像楼主这样做实验程序是不对的。
赞一下 回复此楼
9楼2017-12-15 13:29:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

就是柚子啊！

新虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by arthrospira at 2017-12-15 13:29:51
实际上每一步实验结果都要验证，确认成功才做下一步。像楼主这样做实验程序是不对的。

我不知道你说的验证是指什么！每一步我都跑胶检测了！结果也都在意料之内！

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2017-12-15 13:40:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 就是柚子啊！ 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:21 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:13 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:01 by Aj1rhIDL5ixY
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:00 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 14:57 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-14 12:35 by 40ms4Wlo4umh
[基金申请] 求教各位大神：2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀？ +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +6 recruit123 2026-09-09 6/300 2026-09-14 12:00 by 萨仁其其格
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 3/150 2026-09-14 11:13 by 23jxep3nCNZb
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-14 10:59 by 23jxep3nCNZb
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-14 10:56 by 23jxep3nCNZb
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-14 10:44 by 23jxep3nCNZb
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-14 10:32 by 23jxep3nCNZb
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 10:11 by 23jxep3nCNZb
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 10:01 by 23jxep3nCNZb
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 面上有专家说实验设备不是我们单位的 +6 zj_muchong 2026-09-08 8/400 2026-09-11 06:56 by suifengdao
[有机交流] 科研求助 10+4 我吃一只鱼 2026-09-07 4/200 2026-09-10 08:32 by 0940628
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭