| 查看: 4624 | 回复: 2 | |||
[交流]
有关酵母单杂交验证试验操作相关问题！已有2人参与
|
|
之前大半年都在单杂筛库，现在得到了几个基因，然后克隆出来做点对点的验证。 有几点问题，将基因AD载体和诱饵载体共转之后是涂在SD/-Leu还是SD/-Ura-Leu平板上呢？个人感觉都差不多，平板上是否要加AbA？ 以及后面的挑选阳性克隆是用两对引物检测吗？（启动子和基因） 点斑的时候我看到有的是①用YPDA摇菌，OD有要求吗？然后稀释10、100、1000、10000倍进行点斑，用YPDA稀释还是ddH2O？ 这种稀释点斑的意义是啥？ ②有的点斑是直接挑阳性克隆用0.9%NaCl调制OD=0.2 然后点斑 不知道哪一种比较靠谱或者有各自的优势？ PS最后问一下这种筛库出来的阳性率怎么样？有点担心假阳性的  毕竟课题就是做这个的，好不容易有点结果。 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有184人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
snhajn
新虫 (著名写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 2292.3
- 散金: 1151
- 红花: 17
- 沙发: 2
- 帖子: 1730
- 在线: 132小时
- 虫号: 3013614
- 注册: 2014-03-03
- 性别: MM
- 专业: 食品科学基础
2楼2018-01-24 12:29:13
3楼2018-07-17 08:37:44