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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 请问大家胶回收和酶切反应液回收有啥不一样呀？
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卷哥

金虫 (小有名气)

[求助] 请问大家胶回收和酶切反应液回收有啥不一样呀？ 已有1人参与

请问大家胶回收和酶切反应液回收有啥不一样呀？该怎样判断什么时候切胶回收，什么时候直接回收酶切反应液或PCR产物呢？
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1楼 2017-12-11 14:50:22
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

贱贱JMe

木虫 (小有名气)

教导主任

【答案】应助回帖

★
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-02-08 04:07:22
跑胶回收是为了得到纯净且单一的DNA产物。酶切之后建议跑胶回收，不仅可以直观的看到酶切的情况，而且可以降低后续假阳性概率。与筛选相关可以选择跑胶回收。
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想做一位科研好人
5楼2018-01-25 17:29:02
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含笑少年。

新虫 (初入文坛)
PCR产物经过电泳检测确定是单一的目的片段后，可以直接用PCR反应液回收，酶切后的产物和经电泳检测不是单一条带的PCR产物，必须切胶回收。

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2楼2017-12-12 07:43:55
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木吉吉

新虫 (正式写手)
PCR产物可以用5到6微升跑胶看看，单一条带的话直接回收就行，酶切如果只是切开空载体，或者pcr产物两端的几个bp，也直接回收就行

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3楼2018-01-10 14:41:46
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普通回帖

阿玲哒

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 木吉吉 at 2018-01-10 14:41:46
PCR产物可以用5到6微升跑胶看看，单一条带的话直接回收就行，酶切如果只是切开空载体，或者pcr产物两端的几个bp，也直接回收就行

想请教一下，如果空质粒和线性DNA双酶切后直接酶切液纯化，那些小片段会不会影响后期的质粒和线性DNA的连接呢

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4楼2018-01-24 09:38:35
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贱贱JMe

木虫 (小有名气)

教导主任

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 阿玲哒 at 2018-01-24 09:38:35
想请教一下，如果空质粒和线性DNA双酶切后直接酶切液纯化，那些小片段会不会影响后期的质粒和线性DNA的连接呢
...

这里的“那些小片段” 包含好几种的吧，如果你认为纯化可以去掉切掉的短片段是没毛病的，但是前提需要酶切完全。
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想做一位科研好人
6楼2018-01-25 17:34:01
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阿玲哒

新虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 贱贱JMe at 2018-01-25 17:34:01
这里的“那些小片段” 包含好几种的吧，如果你认为纯化可以去掉切掉的短片段是没毛病的，但是前提需要酶切完全。...

我觉得是有影响的，还是切胶回收比较准确

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7楼2018-01-25 19:50:43
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贱贱JMe

木虫 (小有名气)

教导主任
引用回帖:
7楼: Originally posted by 阿玲哒 at 2018-01-25 19:50:43
我觉得是有影响的，还是切胶回收比较准确
...

那你还问
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想做一位科研好人
8楼2018-01-26 09:26:37
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阿玲哒

新虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 贱贱JMe at 2018-01-26 09:26:37
那你还问...

我的天，这不是还在学习中么，就害怕错了才问的，

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9楼2018-01-26 09:30:15
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)
磁珠法回收特定长度片段

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10楼2018-01-26 14:26:03
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