| 查看: 757 | 回复: 6 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
[交流]
悬赏30个金币 设计一个实验
|
|||
| 从蛋白质出发克隆这个蛋白质的编码基因,写出详细的实验步骤,各位大侠要是能提供可行 详细的方案 我愿意送其金币30个 |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有8人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有9人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有6人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有9人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有11人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有9人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有9人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有12人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有7人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有8人回复
2楼2009-02-27 07:58:29
3楼2009-02-27 12:54:05
Ella14
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 142.9
- 散金: 9
- 帖子: 227
- 在线: 17.4小时
- 虫号: 442710
- 注册: 2007-10-27
- 性别: MM
- 专业: 细胞衰老
4楼2009-02-27 23:52:56
5楼2009-03-04 20:27:54
6楼2009-03-04 21:06:26
winter_gates
金虫 (正式写手)
生命过客
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1161.8
- 散金: 100
- 红花: 1
- 帖子: 615
- 在线: 20.4小时
- 虫号: 541629
- 注册: 2008-04-08
- 专业: 生物化学
|
二楼的比较对，这种实验是要自己去查文献和书来自己思考的，最好不要依赖别人，那样你自己学到的太少，而且会得到很多错误的经验。相应的教科书有很多，建议楼主先看看比较广泛介绍的书，在找具体相关领域的看。不要随便相信别人。 比如3楼说底物诱导表达，这个是基本上不可能实现的吧，你都不知道该蛋白质是什么有什么性质什么作用，怎么可能去诱导？ 从生物体中直接提取某种天然蛋白的难度之大、复杂程度之高，没有具体实践很难明白。当然运气好除外。 我不是搞这个的，但是多少上课的时候听到过一些，多少给楼主说说吧，但是实际情况要实际分析，不能僵硬的去套模式。 1st 首先搞清楚你为什么去研究这个蛋白，这个蛋白相应的研究状况如何，它上下游的蛋白有哪些，有哪些蛋白与它相互作用，那些蛋白有可能调节它，它最可能参与的生物学过程。 2ed 参照你搜索到的资料的情况，上该物种的基因组数据库（多数的研究对象都有基因组数据库了）或者相近物种的数据库，查询该蛋白可能的相近蛋白的序列。BLAST你的目的蛋白（这里存在相似度高低的问题）。如果能找到最好，找到就可以直接PCR扩增，克隆表达。如果找不到，或者结果不能确定，那么转向第三步。 3rd 分离你的目的蛋白。这里方法很多，比如双向电泳、层析纯化、FISH实验等等。但是该过程是非常复杂的。分离出该蛋白后，可以打质谱测序，当然你只能拿到N端或者C端的小部分序列。那么走到这一步，如果难道的雪列是正确的，你已经是幸运儿了。 4th EST walking或者如2楼所讲RACE技术寻找或者测得全序列。这个我没有深入研究过，你要另请高人。到此，楼主的要求已经基本完成。剩下的就是鉴定该基因是否就是你的目的蛋白。这个也是一个满复杂的过程，因为视蛋白来源不同，验证方法太多，不好一一列举。 其实这应该是真正的研究开始，楼主要求的仅仅是对该蛋白研究的最初过程。 一点愚见，抛砖引玉，如有错误还要海涵。要想得到很详细的研究方案，还要楼主多查一查书和相关的文献。 |
7楼2009-03-04 22:48:05
