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muchong5577

金虫 (正式写手)

[交流] 金币求技术

大家好,你们做过包涵体的可溶性表达吗?能否告诉我详细的试验方法?我的菌是BL21,载体pET28a,蛋白32kd。
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by muchong5577 at 2010-01-28 21:37:59:

你有什么好的复性方法吗?

最常用也是最有效的就是透析复性。我做过的一般除了模蛋白,都可以成功复性。
你可以查查相关文献。
生物资源交流QQ群:1044518333
12楼2010-01-29 08:53:07
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Charlie1331

金虫 (正式写手)


muchong5577(金币+1,VIP+0):谢谢 2-26 18:29
这个不同的蛋白有不同的策略,LZ还是多看些文献吧。
2楼2009-02-26 14:18:33
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catzp

银虫 (小有名气)


muchong5577(金币+1,VIP+0):谢谢 2-26 18:30
先摸条件吧,一般的Pet表达都是防止包涵体的生成,也就是低温诱导,低速摇床,低IPTG。至于具体情况,需要在预试验摸
3楼2009-02-26 15:30:38
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hugang2004_2000

木虫 (正式写手)

muchong5577(金币+1): 2010-01-28 17:27
可以试一下换一个带GST标签的表达载体。可溶性增大后在同等条件下成为包涵体的机会小一些。
4楼2010-01-28 01:09:50
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