应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 金币求技术
121/2返回列表12下一页
查看: 391  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

muchong5577

金虫 (正式写手)

[交流] 金币求技术

大家好，你们做过包涵体的可溶性表达吗？能否告诉我详细的试验方法？我的菌是BL21，载体pET28a，蛋白32kd。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-02-26 13:17:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Charlie1331

金虫 (正式写手)
★
muchong5577(金币+1,VIP+0):谢谢 2-26 18:29
这个不同的蛋白有不同的策略，LZ还是多看些文献吧。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-02-26 14:18:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

catzp

银虫 (小有名气)
★
muchong5577(金币+1,VIP+0):谢谢 2-26 18:30
先摸条件吧，一般的Pet表达都是防止包涵体的生成，也就是低温诱导，低速摇床，低IPTG。至于具体情况，需要在预试验摸
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2009-02-26 15:30:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hugang2004_2000

木虫 (正式写手)
muchong5577(金币+1): 2010-01-28 17:27
可以试一下换一个带GST标签的表达载体。可溶性增大后在同等条件下成为包涵体的机会小一些。
赞一下 回复此楼
4楼2010-01-28 01:09:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qrf0704

铁虫 (小有名气)
muchong5577(金币+1): 2010-01-28 17:26
我现在也在做重组蛋白的表达，也是包涵体，但是发现低温诱导可以改善其表达的情况，上清液中会有蛋白了，或者你用盐酸胍或者尿素来处理包涵体。
赞一下 回复此楼
5楼2010-01-28 13:00:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

muchong5577

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by qrf0704 at 2010-01-28 13:00:03:
我现在也在做重组蛋白的表达，也是包涵体，但是发现低温诱导可以改善其表达的情况，上清液中会有蛋白了，或者你用盐酸胍或者尿素来处理包涵体。

那你用的是什么载体，是在什么菌里表达呢？
赞一下 回复此楼
6楼2010-01-28 17:26:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangjh069975

银虫 (初入文坛)
也可以离心，观察一下沉淀中的蛋白
赞一下 回复此楼
心若在，梦就在！
7楼2010-01-28 17:31:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

towindflower

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by muchong5577 at 2009-02-26 13:17:18:
大家好，你们做过包涵体的可溶性表达吗？能否告诉我详细的试验方法？我的菌是BL21，载体pET28a，蛋白32kd。

都包涵体的还怎么可溶表达,只能说的摸索可溶表达的条件,可以降低诱导强度,温度,换roseta.....
赞一下 回复此楼
8楼2010-01-28 17:53:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)
muchong5577(金币+1):你有什么好的复性方法吗？ 2010-01-28 21:37
没事还是别在可溶性表达上费功夫。IB表达后纯化，复性。一般情况下得率很高，也会有活性。
赞一下 回复此楼
生物资源交流QQ群：1044518333
9楼2010-01-28 18:04:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

muchong5577

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by snoopyzxx at 2010-01-28 18:04:59:
没事还是别在可溶性表达上费功夫。IB表达后纯化，复性。一般情况下得率很高，也会有活性。

你有什么好的复性方法吗？
赞一下 回复此楼
10楼2010-01-28 21:37:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 muchong5577 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0854电子信息求调剂 +3 α____ 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:28 by zhq0425
[考研] 298求调剂 +6 上岸6666@ 2026-03-20 6/300 2026-03-22 20:21 by edmund7
[考研] 考研调剂 +4 来好运来来来 2026-03-21 4/200 2026-03-22 12:15 by 星空星月
[考研] 生物学一志愿985，分数349求调剂 +4 zxts12 2026-03-21 7/350 2026-03-22 09:57 by zxts12
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 265求调剂 +9 梁梁校校 2026-03-17 9/450 2026-03-21 02:17 by JourneyLucky
[考研] 材料 336 求调剂 +3 An@. 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:39 by JourneyLucky
[考研] 华东师范大学-071000生物学-293分-求调剂 +3 研究生何瑶明 2026-03-18 3/150 2026-03-21 01:30 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +6 www_q 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 材料专硕英一数二306 +7 z1z2z3879 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:48 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂，总分315（英一） +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 085601专硕，总分342求调剂，地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 0854可跨调剂，一作一项核心论文五项专利，省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭