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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】芦丁的标准曲线？
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morningwind

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助】芦丁的标准曲线？

用分光光度法做芦丁的标准曲线时，按照参考文献的做法，用硝酸铝显色，个别试管中有浑浊。即使澄清的液体在比色皿中过段时间也会有絮状物生成。这是怎么回事？谁有比较好的方法做标曲吗？
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1楼 2009-02-25 13:12:54
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沙谷幽兰

木虫 (小有名气)
换种显色剂或者把浓度调低一点试试，你是用分光光度法做什么实验
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2楼2009-02-25 13:28:42
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suly13

金虫 (小有名气)

佐龙佑虎双花大红棍
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢指教！ 2-25 20:06
2000版中国药典一部“槐米”项下“芦丁的含量测定”
【含量测定】  对照品溶液的制备  精密称取在120℃ 减压干燥至恒重的芦丁对照品200mg,置100ml 量瓶中，加甲醇70ml，置水浴上微热使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀。精密吸取10ml，置100ml 量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
    标准曲线的制备  精密量取对照品溶液0ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml与6.0ml,分别置25ml量瓶中，各加水至6ml,加 5％亚硝酸钠溶液1ml,使混匀，放置 6分钟，加10％硝酸铝溶液1ml,摇匀，放置6 分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，照分光光度法（附录Ⅴ B），在500nm 的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。                                            
    测定法  取本品粗粉约1g，于60℃干燥6 小时，精密称定，置索氏提取器中，加乙醚120ml,加热回流至提取液无色，放冷，弃去乙醚液。再加甲醇90ml，加热回流至提取液无色，移置100ml 量瓶中，用甲醇少量洗涤容器，洗液并入量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。精密量取10ml，置100ml 量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密量取3ml,置25ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加水至 6ml”起依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量(μg) ，计算 ，即得。                                                  
    本品于60℃干燥 6小时，含芦丁(C27H30O16) 槐花不得少于8.0％ ，槐米不得少于20.0％。

[ Last edited by suly13 on 2009-2-25 at 13:42 ]
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3楼2009-02-25 13:37:46
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suly13

金虫 (小有名气)

佐龙佑虎双花大红棍
★ ★ ★ ★ ★
morningwind(金币+5,VIP+0):ths 2-25 22:03
用紫外分光光度法测定的时候要注意反应时间和测定时间。

楼主所说的情况分析原因有2种：
1、样品的处理方法有待优化。

2、各种反应原料是否合格。

3、测定时间没控制好。
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4楼2009-02-25 13:46:11
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tyjackie

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
morningwind(金币+2,VIP+0):ths 2-25 22:04
morningwind(金币+1,VIP+0):ths 2-26 12:30
芦丁的黄酮含测我之前做过，应该还好的，操作：样品用60%乙醇溶解，显示时先用亚硝酸钠、再加硝酸铝，最好加10%氢氧化钠，加水定容，应该还好的。不知道lz的是不是样品浓度太大引起的？
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5楼2009-02-25 13:53:57
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morningwind

木虫 (著名写手)
我做标曲时出现的状况，芦丁浓度是0.3mg/ml，分别加入0，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml到10ml容量瓶，加30%乙醇至1ml，加入5%亚硝酸钠0.5，静置6min，10%硝酸铝0.3，静置6min，10%氢氧化钠3ml，静置15min
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6楼2009-02-25 16:55:14
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
morningwind(金币+2,VIP+0):ths 2-26 12:29
也许LZ所用的浓度大了点吧 稀释下试试
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7楼2009-02-25 23:39:23
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