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morningwind

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助】芦丁的标准曲线?

用分光光度法做芦丁的标准曲线时,按照参考文献的做法,用硝酸铝显色,个别试管中有浑浊。即使澄清的液体在比色皿中过段时间也会有絮状物生成。这是怎么回事?谁有比较好的方法做标曲吗?
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沙谷幽兰

木虫 (小有名气)

换种显色剂或者把浓度调低一点试试,你是用分光光度法做什么实验
2楼2009-02-25 13:28:42
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suly13

金虫 (小有名气)

佐龙佑虎双花大红棍


karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢指教! 2-25 20:06
2000版中国药典一部“槐米”项下“芦丁的含量测定”
【含量测定】  对照品溶液的制备  精密称取在120℃ 减压干燥至恒重的芦丁对照品200mg,置100ml 量瓶中,加甲醇70ml,置水浴上微热使溶解,放冷,加甲醇至刻度,摇匀。精密吸取10ml,置100ml 量瓶中,加水至刻度,摇匀,即得。
    标准曲线的制备  精密量取对照品溶液0ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml与6.0ml,分别置25ml量瓶中,各加水至6ml,加 5%亚硝酸钠溶液1ml,使混匀,放置 6分钟,加10%硝酸铝溶液1ml,摇匀,放置6 分钟,加氢氧化钠试液10ml,再加水至刻度,摇匀,放置15分钟,照分光光度法(附录Ⅴ B),在500nm 的波长处测定吸收度,以吸收度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。                                            
    测定法  取本品粗粉约1g,于60℃干燥6 小时,精密称定,置索氏提取器中,加乙醚120ml,加热回流至提取液无色,放冷,弃去乙醚液。再加甲醇90ml,加热回流至提取液无色,移置100ml 量瓶中,用甲醇少量洗涤容器,洗液并入量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。精密量取10ml,置100ml 量瓶中,加水至刻度,摇匀。精密量取3ml,置25ml量瓶中,照标准曲线制备项下的方法,自“加水至 6ml”起依法测定吸收度,从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量(μg) ,计算 ,即得。                                                  
    本品于60℃干燥 6小时,含芦丁(C27H30O16) 槐花不得少于8.0% ,槐米不得少于20.0%。

[ Last edited by suly13 on 2009-2-25 at 13:42 ]
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3楼2009-02-25 13:37:46
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suly13

金虫 (小有名气)

佐龙佑虎双花大红棍

★ ★ ★ ★ ★
morningwind(金币+5,VIP+0):ths 2-25 22:03
用紫外分光光度法测定的时候要注意反应时间和测定时间。

楼主所说的情况分析原因有2种:
1、样品的处理方法有待优化。

2、各种反应原料是否合格。

3、测定时间没控制好。
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4楼2009-02-25 13:46:11
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tyjackie

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
morningwind(金币+2,VIP+0):ths 2-25 22:04
morningwind(金币+1,VIP+0):ths 2-26 12:30
芦丁的黄酮含测我之前做过,应该还好的,操作:样品用60%乙醇溶解,显示时先用亚硝酸钠、再加硝酸铝,最好加10%氢氧化钠,加水定容,应该还好的。不知道lz的是不是样品浓度太大引起的?
5楼2009-02-25 13:53:57
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morningwind

木虫 (著名写手)

我做标曲时出现的状况,芦丁浓度是0.3mg/ml,分别加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml到10ml容量瓶,加30%乙醇至1ml,加入5%亚硝酸钠0.5,静置6min,10%硝酸铝0.3,静置6min,10%氢氧化钠3ml,静置15min
6楼2009-02-25 16:55:14
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
morningwind(金币+2,VIP+0):ths 2-26 12:29
也许LZ所用的浓度大了点吧 稀释下试试
7楼2009-02-25 23:39:23
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