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feifei2012

金虫 (小有名气)

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[交流] 绿脓杆菌，怎么操作，才能保证重复实验中细菌生长或活性基本一致？

各位大侠，
本人微生物小白，请问做细菌（绿脓杆菌）生长实验中。怎么样操作，才能保证重复实验中细菌生长或活性基本一致？

情况说明：

三次不同日期的重复实验：

从平板培养基上取单菌落，接种环在10ml TSB培养液中充分搅拌后，240rpm、37度过夜培养。每次相同的时间后，测得的OD值（e.g. 1.25, 0.90）不尽相同，而且有时候肉眼看，细菌就没有长起来。

那么，OD值（e.g. 1.25, 0.90）不同的菌悬液经过稀释得到同样OD值（e.g. 0.01）的稀释后菌液。这个稀释后的菌液拿去做细菌生长实验，是不是生长曲线或活性不一样？是不是有的长得快，有的长得慢？

看到有的人是这样做的：

先培养一定OD值的菌悬液，然后放4度冷藏，需要时再将菌液稀释使用。这样可行吗？冷藏大概能用多久？

需要指数期的细菌，怎么控制，把握呢。谢谢！

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1楼 2017-11-24 13:24:42

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feifei2012

金虫 (小有名气)

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引用回帖:

3楼: Originally posted by 狗狗狗尾巴草 at 2017-11-24 14:19:36
不同OD值稀释得到的OD0.01的菌体生长状况不能保证是一样的。OD值检测的只是培养基的浑浊度，不能区分死菌和活菌。细菌生长时间越长，死菌越多，OD1.2的话，至少培养24小时。建议用OD值小于1的菌液稀释。理论上绿脓在 ...

谢谢！那我就先培养到一定浓度再冷藏起来吧

发自小木虫IOS客户端