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绿脓杆菌,怎么操作,才能保证重复实验中细菌生长或活性基本一致?
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各位大侠, 本人微生物小白,请问做细菌(绿脓杆菌)生长实验中。怎么样操作,才能保证重复实验中细菌生长或活性基本一致? 情况说明: 三次不同日期的重复实验: 从平板培养基上取单菌落,接种环在10ml TSB培养液中充分搅拌后,240rpm、37度过夜培养。每次相同的时间后,测得的OD值(e.g. 1.25, 0.90)不尽相同,而且有时候肉眼看,细菌就没有长起来 。 那么,OD值(e.g. 1.25, 0.90)不同的菌悬液经过稀释得到同样OD值(e.g. 0.01)的稀释后菌液。这个稀释后的菌液拿去做细菌生长实验,是不是生长曲线或活性不一样?是不是有的长得快,有的长得慢? 看到有的人是这样做的: 先培养一定OD值的菌悬液,然后放4度冷藏,需要时再将菌液稀释使用。这样可行吗?冷藏大概能用多久? 需要指数期的细菌,怎么控制,把握呢。谢谢! |
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snoopytbw: 金币+3, 鼓励 2017-11-25 07:16:13
feifei2012(金币+1): 谢谢参与
snoopytbw: 金币+3, 鼓励 2017-11-25 07:16:13
| 不同OD值稀释得到的OD0.01的菌体生长状况不能保证是一样的。OD值检测的只是培养基的浑浊度,不能区分死菌和活菌。细菌生长时间越长,死菌越多,OD1.2的话,至少培养24小时。建议用OD值小于1的菌液稀释。理论上绿脓在4°不生长,至于能放多久就不知道了。 |
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3楼2017-11-24 14:19:36
16楼2017-11-24 23:59:42
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用96孔板上酶标仪测。我们实验室这样测:过夜摇菌,第二天早上测od值,把od调到一致,在摇床摇 每隔二小时拿96孔板去酶标仪扫一下,把od和发光都测了 发自小木虫Android客户端 |
17楼2017-11-25 00:02:50
18楼2017-11-26 13:27:24
19楼2017-11-26 13:28:20
23楼2017-11-27 10:24:26
28楼2017-11-28 11:06:10
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hydzp2楼
2017-11-24 13:52
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feifei2012(金币+1): 谢谢参与
祝福 发自小木虫IOS客户端
tzynew4楼
2017-11-24 14:30
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ylheping5楼
2017-11-24 14:39
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youngen6楼
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2017-11-24 15:41
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bdc 发自小木虫Android客户端
2017-11-24 15:51
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啊哦呃咦呜吁10楼
2017-11-24 16:57
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gengxin6011楼
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