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云中君123

新虫 (初入文坛)

[求助] 分子生物学问题

设计两段引物,使其退火后形成的双链DNA序列可以直接与bamh1(识别序列为G|GATCC)和hind酶(识别A|AGCTT)双酶切后的psilencer2-1U6连接,构成重组质粒,实现上述目标,请写出两段引物退火后形成的双链DNA序列。

这种题怎么做呀?跪求解答!!!

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云中君123

新虫 (初入文坛)

题目是这样的
2.siRNA是一项可以有效降低或关闭特定基因表达的技术手段、某实验室准备在一种人源的肝癌细胞系中,降低某基因的表达水平,并已通过数据库确定了siRNA 的靶序列为GAATGAGCCGTATATGCCA.现拟通过pSilencer2.l-U6 表达载体克隆一段shdna,通过转移重组的pU6质粒进入细胞,表达ShRNA( short hairpin RNA) 来实现上述目的。质粒图谱如下图所示。ShDNA 将被克隆在U6Promotor 的下游BamH I和Hind 位点之间,U6 Promotor是人RNA 聚合酶I 的启动子,方向如图所示。RNA 聚合酶I 的转录终止信号为TTITTT,启动子下游不含有此
序列。根据上述提示,请回答以下问题:

(2 )设计两段引物序列,使其退火后所形成的双链DNA 序列可以直接与BamH I( 酶
切识别序列为G ↓GATCC) 和Hind 酶切识别序列为A ↓AGCTT) 双酶切后的pSilencer2.1-U6连接,构建重组质粒,实现上述目标。请写出这两段引物退火后所形成的双链DNA
序列。

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2楼2017-11-23 16:29:10
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