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4楼
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Originally posted by
monet1234
at 2017-11-17 12:52:19
his标签蛋白呢?多少KDa?我的目的蛋白在原有的基础上只增加了不超过10kDa
...
his标签在ORF1前,不过有两个,140-157和270-287, 不过你的目的蛋白应该是插入在多克隆位点里,这个表达的方向与ORF1蛋白正好相反,不应该考虑ORF1的蛋白大小,应该就是你目的蛋白的大小大概10kDa左右。两个标签看你用哪个了,一个在上游一个在下游
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6楼
:
Originally posted by
monet1234
at 2017-11-17 16:10:12
我是用的BamH l和Hind lll这两个酶切的载体
...
那你表达蛋白就是目的蛋白的大小,His标签的大小基本可以忽略不计,但是要注意,如果你想要使用上游的标签,在插入目的基因时要在Hind III序列前加入目的基因终止序列,如果要使用下游标签,要去掉目的基因终止序列
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