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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 弱问：提DNA时，异丙醇沉淀DNA离心后的沉淀，用 75%酒精洗3次
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rongshuxia

木虫 (著名写手)

[交流] 弱问：提DNA时，异丙醇沉淀DNA离心后的沉淀，用 75%酒精洗3次

洗  
在这里是 1、离心 ？  2、倒进去马上倒出来？

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-5 at 20:58 ]
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1楼 2009-02-22 18:19:55
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢帮助,欢迎常来~ 2-22 20:08
加入酒精，弹管壁，使得沉淀分散，然后离心收集沉淀，倒掉酒精
短暂离心，收集管壁残留酒精，吸掉
其实洗一次都够的了……
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2楼2009-02-22 18:23:05
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rongshuxia

木虫 (著名写手)
具体离心条件呢？
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3楼2009-02-22 18:40:22
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
不等，你可以选择11000xg 离10min
其实10000转上下都是可以的，高了没必要
低了就离久一点，当然也不能太低，比如不要低于7500rpm
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4楼2009-02-22 18:42:53
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小猫三两只

金虫 (正式写手)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):3Q~ 2-22 20:08
我平时用的都是12000rpm。一般至少15min。这样倒的时候不容易把DNA也倒掉。一般洗1-2次就行了，可再用100%的洗一次，这样容易吹干
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5楼2009-02-22 19:15:33
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rongshuxia

木虫 (著名写手)
多谢楼上两位


ATP朋友，如果两次，第二次要短暂离心，也是10000r/m的转速吗？ 时间呢？

高速 短暂离心 允许吗？对离心机是不是不大好
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6楼2009-02-23 18:46:05
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by rongshuxia at 2009/2/23, 18:46:
多谢楼上两位


ATP朋友，如果两次，第二次要短暂离心，也是10000r/m的转速吗？ 时间呢？

高速 短暂离心 允许吗？对离心机是不是不大好

短暂离心只是为了收集管壁残留的乙醇
我是放在那种小型台式离心机按那个short spin来做的
五六秒都可以了~~转速不一定的，随便转一下就好了
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7楼2009-02-23 18:55:49
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rongshuxia

木虫 (著名写手)
多谢了
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8楼2009-02-24 12:04:47
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rongshuxia

木虫 (著名写手)
我怎么觉得不对呢

异丙醇 -20度沉淀DNA2h，12000r/m 15min后 得到沉淀
再加0.5ml 75%酒精 沉淀根本分散不了，用液体混合器也打散不了
用枪头吹打吧？？？？？？？？？？

弹管壁 根本就不行
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9楼2009-05-30 15:59:13
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tangtl

木虫 (正式写手)

小木虫潜水者
先渦旋，然后離心，最大轉數，１０ｍｉｎ以上！
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10楼2009-05-30 16:10:17
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