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rongshuxia

木虫 (著名写手)

[交流] 弱问:提DNA时,异丙醇沉淀DNA离心后的沉淀,用 75%酒精洗3次

洗  
在这里是 1、离心 ?  2、倒进去马上倒出来?

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-5 at 20:58 ]
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢帮助,欢迎常来~ 2-22 20:08
加入酒精,弹管壁,使得沉淀分散,然后离心收集沉淀,倒掉酒精
短暂离心,收集管壁残留酒精,吸掉
其实洗一次都够的了……
2楼2009-02-22 18:23:05
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rongshuxia

木虫 (著名写手)

具体离心条件呢?
3楼2009-02-22 18:40:22
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

不等,你可以选择11000xg 离10min
其实10000转上下都是可以的,高了没必要
低了就离久一点,当然也不能太低,比如不要低于7500rpm
4楼2009-02-22 18:42:53
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小猫三两只

金虫 (正式写手)


lwf991229(金币+1,VIP+0):3Q~ 2-22 20:08
我平时用的都是12000rpm。一般至少15min。这样倒的时候不容易把DNA也倒掉。一般洗1-2次就行了,可再用100%的洗一次,这样容易吹干
5楼2009-02-22 19:15:33
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rongshuxia

木虫 (著名写手)

多谢楼上两位


ATP朋友,如果两次,第二次要短暂离心,也是10000r/m的转速吗? 时间呢?

高速 短暂离心 允许吗?对离心机是不是不大好
6楼2009-02-23 18:46:05
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
Originally posted by rongshuxia at 2009/2/23, 18:46:
多谢楼上两位


ATP朋友,如果两次,第二次要短暂离心,也是10000r/m的转速吗? 时间呢?

高速 短暂离心 允许吗?对离心机是不是不大好

短暂离心只是为了收集管壁残留的乙醇
我是放在那种小型台式离心机按那个short spin来做的
五六秒都可以了~~转速不一定的,随便转一下就好了
7楼2009-02-23 18:55:49
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rongshuxia

木虫 (著名写手)

多谢了
8楼2009-02-24 12:04:47
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rongshuxia

木虫 (著名写手)

我怎么觉得不对呢

异丙醇 -20度沉淀DNA2h,12000r/m 15min后 得到沉淀
再加0.5ml 75%酒精 沉淀根本分散不了,用液体混合器也打散不了
用枪头吹打吧??????????

弹管壁 根本就不行
9楼2009-05-30 15:59:13
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tangtl

木虫 (正式写手)

小木虫潜水者

先渦旋,然后離心,最大轉數,10min以上!
10楼2009-05-30 16:10:17
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