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971849652xj

新虫 (初入文坛)

[求助] 重组毕赤酵母分批培养过程中pH一直上升,培养6小时后,从初始的7.1一直上升到8.28

7L罐子,3L无机盐BSM培养基,新手第一次做发酵罐,培养基初始pH没有调到6.0,上了罐子,屏幕显示pH为7.1,培养了6小时后,pH一直慢慢爬到8.28,还在持续上升,用的1 M的稀硫酸,100%恒速流加,不仅不降反而一直在升,溶氧维持在91%左右。我停止补酸后pH在8.27和8.28跳动,不再上升。求知道朋友帮帮忙,我现在应该怎么办让pH降下来,换浓度更高的酸么,8点几酵母可以生存但是生长缓慢吧。种子液长了26h,但是当时还没有实消好,就把种子液放冰箱了,怕长过了菌种老化。是因为菌种已经老化,在慢慢死亡么?求助
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qdw54321

金虫 (小有名气)

invitrogen公司 毕赤酵母发酵手册好好看看,你发酵明显有问题。有碳源的话,pH和溶氧都会下降,你湿重测了么

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做我想做
2楼2017-10-28 07:28:52
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qdw54321

金虫 (小有名气)

还有镜检了么?上罐前涂个板子

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做我想做
3楼2017-10-28 07:30:44
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qdw54321

金虫 (小有名气)

种子液长好放冰箱里,一般不超过6-7小时没事,只是基础料阶段会稍微长个把小时

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做我想做
4楼2017-10-28 07:32:31
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jimjohntall

金虫 (著名写手)

★ ★ ★
snoopytbw: 金币+3, 鼓励 2017-10-28 15:13:52
基本要重新发酵了。种子液一般就过夜。初始pH值也没有调。这个加酸调了pH值。就用低浓度硫酸。这次基本就是熟悉操作了。祝好

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5楼2017-10-28 07:39:20
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971849652xj

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by qdw54321 at 2017-10-28 07:30:44
还有镜检了么?上罐前涂个板子

还没有镜检,昨天一上罐他pH就慢慢网上升,昨天晚上11点刚上的。种子液是从平板上挑的,摇的摇瓶
6楼2017-10-28 09:47:19
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971849652xj

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by qdw54321 at 2017-10-28 07:32:31
种子液长好放冰箱里,一般不超过6-7小时没事,只是基础料阶段会稍微长个把小时

好,谢谢
7楼2017-10-28 09:47:45
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971849652xj

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jimjohntall at 2017-10-28 07:39:20
基本要重新发酵了。种子液一般就过夜。初始pH值也没有调。这个加酸调了pH值。就用低浓度硫酸。这次基本就是熟悉操作了。祝好

😭😭😭那这具体是什么原因呢?因为我没有调初始pH么
8楼2017-10-28 09:48:42
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971849652xj

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by qdw54321 at 2017-10-28 07:28:52
invitrogen公司 毕赤酵母发酵手册好好看看,你发酵明显有问题。有碳源的话,pH和溶氧都会下降,你湿重测了么

那个手册不是摇瓶体积么?昨天晚上11点上的罐子,当时一上罐子初始pH是7,一上罐子就慢慢往上爬。加稀硫酸往上爬,不加就不爬但是也不降。是我硫酸的问题么,是配好之后再高温高压灭菌的,是问了老师说可以高温高压灭菌。
9楼2017-10-28 09:51:27
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竹叶水

银虫 (初入文坛)

一般发酵都是补碱的。发酵初期pH一般是要降低的,若上升,多因少量溶菌造成,不严重时不必管它。另外初始pH参考发酵手册上说的是5-6之间,不知为何你设那么高?我们有用pH5.5维持发酵成功的案例,可以借鉴。

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10楼2017-10-28 19:53:47
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