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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » 植物代谢组学样品前处理
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xujingyuanxu

铜虫 (正式写手)

[交流] 植物代谢组学样品前处理

本人想做植物次生代谢产物方面的代谢组学研究，主要是关注的是植物的黄酮类成分。对样品的前处理方式如下，哪里有不足望各位指点：
样品处理方法：
取新鲜样品液氮冷冻后迅速研磨成粉末，然后进行冷冻干燥
配置70%的甲纯作为提取溶剂，提取溶剂中加入一定量的芦丁作为内标物质
精密称取冻干样品10mg，加入提取溶剂4ml，室温超声提取30min（100HKZ）
13000rpm离心取上清液，过0.22μm的滤膜，然后进液相检测，将样品液稀释至合适的浓度范围
将每个样品取500μL加入1.5ml离心管中，室温下氮气吹干
样品用500μL的70%甲醇复溶，离心后取上清，上机检测。

注意：
1：先用不含芦丁的70%甲纯溶液按方法提取后进液相，看峰高大概是多少，然后计算稀释的倍数，确保样品中最高峰高不超过200
2：将稀释好的样品及芦丁液进液质检测，看样品中是否芦丁。
3：芦丁进液相看出峰时间及峰高，将其稀释至峰高约20至30左右
4：每组样品约8~10个重复
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1楼 2017-10-20 14:09:08
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笑侠楚留香

新虫 (小有名气)
★
xujingyuanxu(金币+1): 谢谢参与
没什么问题

发自小木虫Android客户端
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4楼2017-10-26 23:35:04
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nono20092楼
2017-10-23 00:09   回复  
xujingyuanxu(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
sz_kebaoyuan3楼
2017-10-24 23:28   回复  
xujingyuanxu(金币+1): 谢谢参与
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