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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230

[交流] 谁来帮我分析哈,这啥情况?

下图是我刚泡的pcr。从左往右标号1,2,3,4,5,6,7,8.其中1,2是同一个基因;3,5是相同的基因;4,是marker2000;6,8同一个基因;7
一:1,2是同一个基因,奇怪的是出现的带,要比我要目的基因(144bp)的大,这条带是300+了吧,这个情况,我应该怎么调整。
二:关于3和5,他们应该在110处,这是什么情况,还需要调整退火温度,应该往上跳是吗?还是引物有问题?
三:7,有二聚体,我是不是应该延长退火温度?或者在升高退火温度?
就我这些问题,请大家于百忙中帮忙分析下,感谢!

谁来帮我分析哈,这啥情况?
胶一  3.png
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.....
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吴秋兰

新虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有拖带,估计是不纯,有杂蛋白

发自小木虫Android客户端
14楼2017-10-19 23:46:09
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普通回帖
★
cifer1230(金币+1): 谢谢参与
2楼2017-10-17 11:49:12
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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230

三:写错了,应该是延长退火时间
.....
3楼2017-10-17 11:51:08
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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230

没人关注
.....
4楼2017-10-18 17:33:48
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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230

自己顶,木办法
.....
5楼2017-10-18 17:34:18
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cifer1230

金虫 (著名写手)

6楼2017-10-18 17:34:40
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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230

是我的问题太low,还是怎样?为啥木有人回复我???
.....
7楼2017-10-18 17:36:00
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酷莱博

新虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-10-19 07:44:38
cifer1230: 金币+1, 确实有用 2017-10-19 09:06:41
1.2的片段大小的问题。调什么都没用,应该引物扩出来就是那么大的。主条带却没出来。3,5提高退货温度试试,可以将现在的pcr产物稀释之后做模板,用你的引物阔一下看看是不是单一110的片段。是不是很亮,七有引物二聚体正常,主条带对就行了。

发自小木虫Android客户端
8楼2017-10-18 21:24:47
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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230

引用回帖:
8楼: Originally posted by 酷莱博 at 2017-10-18 21:24:47
1.2的片段大小的问题。调什么都没用,应该引物扩出来就是那么大的。主条带却没出来。3,5提高退货温度试试,可以将现在的pcr产物稀释之后做模板,用你的引物阔一下看看是不是单一110的片段。是不是很亮,七有引物二 ...

想问下您,为啥1,2条带不亮呢?总感觉怪怪的呢
.....
9楼2017-10-19 08:59:29
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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230

求各位帮忙都分析分析,谢谢大家了
.....
10楼2017-10-19 09:07:24
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