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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 谁来帮我分析哈，这啥情况？
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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230

[交流] 谁来帮我分析哈，这啥情况？

下图是我刚泡的pcr。从左往右标号1，2，3，4，5，6，7，8.其中1，2是同一个基因；3，5是相同的基因；4，是marker2000；6，8同一个基因；7
一：1,2是同一个基因，奇怪的是出现的带，要比我要目的基因（144bp）的大，这条带是300+了吧，这个情况，我应该怎么调整。
二：关于3和5，他们应该在110处，这是什么情况，还需要调整退火温度，应该往上跳是吗？还是引物有问题？
三：7，有二聚体，我是不是应该延长退火温度？或者在升高退火温度？
就我这些问题，请大家于百忙中帮忙分析下，感谢！

谁来帮我分析哈，这啥情况？
胶一  3.png
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.....
1楼 2017-10-17 11:48:59
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

吴秋兰

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
有拖带，估计是不纯，有杂蛋白

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14楼2017-10-19 23:46:09
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普通回帖

syhorchid
★
cifer1230(金币+1): 谢谢参与
2楼2017-10-17 11:49:12
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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230
三：写错了，应该是延长退火时间
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.....
3楼2017-10-17 11:51:08
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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230
没人关注
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.....
4楼2017-10-18 17:33:48
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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230
自己顶，木办法
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.....
5楼2017-10-18 17:34:18
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cifer1230

金虫 (著名写手)
6楼2017-10-18 17:34:40
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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230
是我的问题太low,还是怎样？为啥木有人回复我？？？
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7楼2017-10-18 17:36:00
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酷莱博

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-10-19 07:44:38
cifer1230: 金币+1, 确实有用 2017-10-19 09:06:41
1.2的片段大小的问题。调什么都没用，应该引物扩出来就是那么大的。主条带却没出来。3，5提高退货温度试试，可以将现在的pcr产物稀释之后做模板，用你的引物阔一下看看是不是单一110的片段。是不是很亮，七有引物二聚体正常，主条带对就行了。

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8楼2017-10-18 21:24:47
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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230
引用回帖:
8楼: Originally posted by 酷莱博 at 2017-10-18 21:24:47
1.2的片段大小的问题。调什么都没用，应该引物扩出来就是那么大的。主条带却没出来。3，5提高退货温度试试，可以将现在的pcr产物稀释之后做模板，用你的引物阔一下看看是不是单一110的片段。是不是很亮，七有引物二 ...

想问下您，为啥1，2条带不亮呢？总感觉怪怪的呢
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.....
9楼2017-10-19 08:59:29
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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230
求各位帮忙都分析分析，谢谢大家了
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.....
10楼2017-10-19 09:07:24
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