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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 谁来帮我分析哈，这啥情况？
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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230
自己顶，我也是服了我自己了
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.....
11楼2017-10-19 09:18:27
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酷莱博

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
cifer1230: 金币+2 2017-10-20 08:47:45
引用回帖:
9楼: Originally posted by cifer1230 at 2017-10-19 08:59:29
想问下您，为啥1，2条带不亮呢？总感觉怪怪的呢...

pcr条带不亮，pcrmix没问题，最主要是模板的量的问题。要不纯化一下模板，增大模板量。简单的办法。你的pcr产物的模板量足够。可以稀释10，100倍做模板，直接用你的1，2组引物扩增。这个条带应该很亮。这个没啥问题的话，就从模板纯化入手。如果这个也不亮，可能就是pcr试剂不适合你的引物模板。最终都是要测序确认。测序一个反应十几块钱，以产物为模板多扩点测个序，正确的话就优化pcr条件。酶，mg2+之类的。错误的话就查引物

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12楼2017-10-19 12:45:25
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petty04

新虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我感觉问的问题确实不在点子上。引物序列贴出来，查查引物特异性好不好，不然没人能帮你分析

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13楼2017-10-19 21:59:06
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吴秋兰

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
有拖带，估计是不纯，有杂蛋白

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14楼2017-10-19 23:46:09
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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230
引用回帖:
12楼: Originally posted by 酷莱博 at 2017-10-19 12:45:25
pcr条带不亮，pcrmix没问题，最主要是模板的量的问题。要不纯化一下模板，增大模板量。简单的办法。你的pcr产物的模板量足够。可以稀释10，100倍做模板，直接用你的1，2组引物扩增。这个条带应该很亮。这个没啥问题 ...

嗯嗯呢，我按您说的试试，谢谢您
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.....
15楼2017-10-20 08:47:38
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