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cifer1230金虫 (著名写手)
cifer1230
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[交流]
谁来帮我分析哈，这啥情况？
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下图是我刚泡的pcr。从左往右标号1，2，3，4，5，6，7，8.其中1，2是同一个基因；3，5是相同的基因；4，是marker2000；6，8同一个基因；7 一：1,2是同一个基因，奇怪的是出现的带，要比我要目的基因（144bp）的大，这条带是300+了吧，这个情况，我应该怎么调整。 二：关于3和5，他们应该在110处，这是什么情况，还需要调整退火温度，应该往上跳是吗？还是引物有问题？ 三：7，有二聚体，我是不是应该延长退火温度？或者在升高退火温度？ 就我这些问题，请大家于百忙中帮忙分析下，感谢！  胶一 3.png |
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3楼2017-10-17 11:51:08
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7楼2017-10-18 17:36:00
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1.2的片段大小的问题。调什么都没用，应该引物扩出来就是那么大的。主条带却没出来。3，5提高退货温度试试，可以将现在的pcr产物稀释之后做模板，用你的引物阔一下看看是不是单一110的片段。是不是很亮，七有引物二聚体正常，主条带对就行了。 发自小木虫Android客户端 |
8楼2017-10-18 21:24:47
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