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我想问一下，做了好多次pcr，电泳检测都没有目的条带，可能是什么原因造成的啊？ 发自小木虫Android客户端 |
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晋鹏
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【答案】应助回帖
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无PCR条带的原因有： 1、摸板问题--------提的DNA里面有抑制剂，DNA提取的量太少，含有有机溶剂和蛋白，乙醇有残留等等都会影响反应。 2、Buffer 问题------有的Buffer只能和指定的酶使用，建议用配套的Buffer。 3、引物问题-------引物设计不当，或者由于反复冻融是引物降解。 4、反应条件问题-----反应条件设置不当。 几点建议： 1.你的DNA提的好像不是很好，有降解；但是你扩的片段不是很大，应该问题不大. 2.DNA不是很纯，可以用0.1NaAC+2.5倍体积乙醇沉淀，70%乙醇洗涤。 3.模板太多，可以适当稀释一下,稀释到DNA浓度1－5ng/ul,取1ul作模板（25ul体系）。 |
2楼2017-10-06 15:49:28