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甜筒D

新虫 (初入文坛)

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[求助] sod，pod测定是遇到的问题已有2人参与

在测定sod的过程中，由于第一批用试剂盒测定的数据不好，只能重新测了，其中2个梯度的材料总共只剩下0.2g叶片材料保存于-80，其他3批材料还有还有0.6g，所以只能按比例减少用量来测定，一共还要测定sod，pod，cat，可溶性糖，Pro，叶绿素含量，mda，任务多，材料少，现在正在探索用0.05g材料去实验，有没有大神懂用的材料少可不可以测定出结果来。
现在的主要问题是我的磷酸缓冲液是0.05mol，ph=7.8的，研磨完液体就会变成红棕色，这样的酶液还能不能用是不是已经失活了还能不能测定？而且很快就会变色，会不会是因为室温太高了造成的？现在由于材料有限，只能讲上清液稀释才够用，稀释之后影响测定结果吗，还是直接用0.05g材料加入5ml缓冲液测定呢？还有就是在4000lx的光下反应8分钟时A0=0 8,按照实验说明就应该停止反应了，可是其他测定管还没有变色，看不出有没有大道50%的抑制率，不明白50%抑制率是一个什么标准。求大神指点，问题有点多

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1楼2017-09-28 18:55:30

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甜筒D

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by 氚核 at 2017-09-28 20:31:29
研磨完的颜色要看你具体的材料是啥。另外根据楼主的描述，建议提取液中添加适量PVP防止组织中的酚氧化产生别的颜色干扰结果。另外，材料一般可以成比例减少用量，但最好保证材料质量和提取液的比例不变，后面公式计 ...

之前生理盐和ph7.0的缓冲液提取是就是绿色的，也不会很快变色，是不是跟这个7.8的缓冲液有关系啊

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