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用thrombin去掉GST标签后蛋白沉淀
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我的蛋白用thrombin去掉GST标签后全部沉淀了,各位高手有什么建议? 我的蛋白预测的等电点在9.6,我用的缓冲液是Tris或者磷酸盐, PH=6,7,8,9都试了,盐的浓度也从100mM-500mM都试了,加了DTT。请我我怎么判断我的蛋白是什么原因引起的沉淀,需要做些什么实验验证。 |
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4楼2018-07-30 21:50:11
sss2172014
木虫 (小有名气)
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- 专业: 生物大分子结构与功能
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gst标签有助溶效果,去掉会沉,说明蛋白溶解性不好。进而推断有大量的疏水区或者电荷区暴露,疏水可以试试加1%的sds,电荷就是调整盐浓度和ph,温度也是一个重要的因素。蛋白是可溶蛋白还是膜蛋白?多少温度切的? 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2017-09-27 15:58:39
3楼2017-10-25 20:31:46













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