| 查看: 1210 | 回复: 3 | |||
[求助]
用thrombin去掉GST标签后蛋白沉淀
|
|
我的蛋白用thrombin去掉GST标签后全部沉淀了，各位高手有什么建议？ 我的蛋白预测的等电点在9.6，我用的缓冲液是Tris或者磷酸盐， PH=6，7，8，9都试了，盐的浓度也从100mM-500mM都试了，加了DTT。请我我怎么判断我的蛋白是什么原因引起的沉淀，需要做些什么实验验证。 |
回复此楼» 猜你喜欢
小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊
已经有13人回复
-
时间戳又变了8-15
已经有15人回复
-
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有58人回复
-
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有7人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有5人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有5人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有8人回复
-
有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验）
已经有9人回复
sss2172014
木虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 3437.6
- 红花: 3
- 帖子: 126
- 在线: 44.9小时
- 虫号: 3248030
- 注册: 2014-06-01
- 专业: 生物大分子结构与功能
|
gst标签有助溶效果，去掉会沉，说明蛋白溶解性不好。进而推断有大量的疏水区或者电荷区暴露，疏水可以试试加1%的sds，电荷就是调整盐浓度和ph，温度也是一个重要的因素。蛋白是可溶蛋白还是膜蛋白？多少温度切的？ 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2017-09-27 15:58:39
3楼2017-10-25 20:31:46
4楼2018-07-30 21:50:11
