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2017mwl

新虫 (小有名气)

[交流] 克隆 已有4人参与

构建表达载体 目的片段和表达载体双酶切后跑胶验证已切完全 16度连接过夜 转化后涂板 空载体对照和实验组一个菌落都没长 怎么回事啊？

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1楼 2017-09-25 09:33:38
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主
感受态细胞不行？
另外建议你把步骤也贴出来也好分析
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2楼2017-09-25 21:12:13
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hzy19930422

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1.看看抗生素有没有用错
2.切胶回收时候是不是出错导致片段，载体没有回收到（可以测个浓度看看）
3.转化时候42度热激后不能激烈震动应该轻拿轻放，否则转化效率会很低很低。
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3楼2017-09-29 11:54:14
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PattyGao

新虫 (小有名气)
抗性搞对了吗？还有感受态是不是不好用了
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4楼2017-10-23 16:08:11
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1，用已知好的质粒做阳性对照--最好每次都做。没菌落就是感受态不好，或转化方法不对。
2， 如果阳性对照没问题， 就是胶回收做得不好，或者连接效率不高
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Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
5楼2018-01-13 12:06:25
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