24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 12233  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

饿的神啊

新虫 (著名写手)

[求助] 载体构建要不要去掉终止子已有1人参与

手上有一个载体构造如下:35S promoter-MCS-GFP-NOS,想在多克隆位点区插入目的基因的CDS序列,构建过表达载体,同时希望GFP蛋白也能表达,是不是设计引物时,CDS序列末端的终止子要删掉?另外,CDS的起始密码子前面需不需要加上Kozak序列呢
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ken19860823

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ken19860823 at 2017-09-21 23:49:33
cds不带终止密码子加p2啊

p2a

发自小木虫Android客户端
5楼2017-09-21 23:50:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

yudaoqian88

至尊木虫 (知名作家)

不良人

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-22 07:40:40
前面的问题我是确定的,要去掉终止密码子,否则蛋白不能融合。后面的问题我不知道,我们都是直接把编码区克隆进去,不加别的序列。

发自小木虫Android客户端
特别喜欢家门口开门的瞬间,宝宝那个高兴呀,蹦蹦跳跳,好不热闹!
2楼2017-09-21 19:32:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

饿的神啊

新虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yudaoqian88 at 2017-09-21 19:32:24
前面的问题我是确定的,要去掉终止密码子,否则蛋白不能融合。后面的问题我不知道,我们都是直接把编码区克隆进去,不加别的序列。

那请问插入的CDS和GFP之间多出十几个碱基没有关系吗,如果正好造成读码框移位,怎么办呢

发自小木虫Android客户端
3楼2017-09-21 23:08:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ken19860823

木虫 (正式写手)

做基因修饰的老菜鸡
4楼2017-09-21 23:49:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见