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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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饿的神啊

新虫 (著名写手)

[求助] 载体构建要不要去掉终止子 已有1人参与

手上有一个载体构造如下:35S promoter-MCS-GFP-NOS,想在多克隆位点区插入目的基因的CDS序列,构建过表达载体,同时希望GFP蛋白也能表达,是不是设计引物时,CDS序列末端的终止子要删掉?另外,CDS的起始密码子前面需不需要加上Kozak序列呢
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yudaoqian88

至尊木虫 (知名作家)

不良人

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-22 07:40:40
前面的问题我是确定的,要去掉终止密码子,否则蛋白不能融合。后面的问题我不知道,我们都是直接把编码区克隆进去,不加别的序列。

发自小木虫Android客户端
特别喜欢家门口开门的瞬间,宝宝那个高兴呀,蹦蹦跳跳,好不热闹!
2楼2017-09-21 19:32:24
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饿的神啊

新虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yudaoqian88 at 2017-09-21 19:32:24
前面的问题我是确定的,要去掉终止密码子,否则蛋白不能融合。后面的问题我不知道,我们都是直接把编码区克隆进去,不加别的序列。

那请问插入的CDS和GFP之间多出十几个碱基没有关系吗,如果正好造成读码框移位,怎么办呢

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3楼2017-09-21 23:08:28
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ken19860823

木虫 (正式写手)

做基因修饰的老菜鸡
4楼2017-09-21 23:49:33
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ken19860823

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ken19860823 at 2017-09-21 23:49:33
cds不带终止密码子加p2啊

p2a

发自小木虫Android客户端
5楼2017-09-21 23:50:05
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饿的神啊

新虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by ken19860823 at 2017-09-21 23:50:05
p2a
...

不好意思,不是很懂啊,意思是CDS去掉终止密码子,加上p2a,可是p2a是什么,怎么加,请赐教?
6楼2017-09-22 09:16:50
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遗丶失

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by ken19860823 at 2017-09-21 23:50:05
p2a
...

求解+1,p2a是指什么?
7楼2017-10-07 14:50:31
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