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Drm_o

新虫 (小有名气)

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[求助] 噬菌体空斑实验以及PEG沉淀收集病毒

f2噬菌体，大肠杆菌285宿主菌
将噬菌体加入pH等于10的介质中，进行空斑实验
结果原液出现下边这种情况：

但梯度稀释后-1，-2剃度空斑均匀分布，长得很好，想问下，这是因为高pH杀死了宿主菌，还是杀死了噬菌体或者让噬菌体聚团了啊

接下来就是PEG6000，13%的比例加进含有噬菌体的溶液里，10000r，4℃条件下离心30min取沉淀冲悬后，噬菌体回收效率特别低，而且没有完全沉淀，上清液中仍然含有噬菌体，想请教下这是什么原因，怎样做可以提高回收率啊？

最近一直被这些问题困扰，感觉快崩溃了，求助大神！

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1楼 2017-09-21 11:51:02

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qidem

铁虫 (小有名气)

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大肠无法耐受这么高pH

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2楼2017-09-25 21:08:31

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liu_y

铜虫 (初入文坛)

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加入PEG之后一般都是4度静置1小时左右吧，楼主实验时没有静置这一步吗？

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3楼2017-10-28 21:02:51

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………

新虫 (初入文坛)

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专业: 病毒学

引用回帖:

1楼: Originally posted by Drm_o at 2017-09-21 11:51:02
f2噬菌体，大肠杆菌285宿主菌
将噬菌体加入pH等于10的介质中，进行空斑实验
结果原液出现下边这种情况：
但梯度稀释后-1，-2剃度空斑均匀分布，长得很好，想问下，这是因为高pH杀死了宿主菌，还是杀死了噬菌体或者 ...

我也做噬菌体不过我在噬菌体核酸提取后发现每次提取的条带都不亮这的怎么办呀能一起交流一下嘛

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4楼2018-03-20 13:34:27

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Drm_o

新虫 (小有名气)

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性别: MM
专业: 环境卫生

引用回帖:

4楼: Originally posted by *………* at 2018-03-20 13:34:27
我也做噬菌体不过我在噬菌体核酸提取后发现每次提取的条带都不亮这的怎么办呀能一起交流一下嘛
...

噬菌体量不够？

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5楼2018-12-18 22:33:01

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