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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 病原/病毒 » 噬菌体空斑实验以及PEG沉淀收集病毒
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Drm_o

新虫 (小有名气)

[求助] 噬菌体空斑实验以及PEG沉淀收集病毒

f2噬菌体，大肠杆菌285宿主菌
将噬菌体加入pH等于10的介质中，进行空斑实验
结果原液出现下边这种情况：


但梯度稀释后-1，-2剃度空斑均匀分布，长得很好，想问下，这是因为高pH杀死了宿主菌，还是杀死了噬菌体或者让噬菌体聚团了啊


接下来就是PEG6000，13%的比例加进含有噬菌体的溶液里，10000r，4℃条件下离心30min取沉淀冲悬后，噬菌体回收效率特别低，而且没有完全沉淀，上清液中仍然含有噬菌体，想请教下这是什么原因，怎样做可以提高回收率啊？

最近一直被这些问题困扰，感觉快崩溃了，求助大神！

噬菌体空斑实验以及PEG沉淀收集病毒


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1楼 2017-09-21 11:51:02
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qidem

铁虫 (小有名气)
大肠无法耐受这么高pH

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2楼2017-09-25 21:08:31
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liu_y

铜虫 (初入文坛)
加入PEG之后一般都是4度静置1小时左右吧，楼主实验时没有静置这一步吗？
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3楼2017-10-28 21:02:51
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*………*

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by Drm_o at 2017-09-21 11:51:02
f2噬菌体，大肠杆菌285宿主菌
将噬菌体加入pH等于10的介质中，进行空斑实验
结果原液出现下边这种情况：
但梯度稀释后-1，-2剃度空斑均匀分布，长得很好，想问下，这是因为高pH杀死了宿主菌，还是杀死了噬菌体或者 ...

我也做噬菌体  不过我在噬菌体核酸提取后   发现每次提取的条带都不亮  这的怎么办呀  能一起交流一下嘛

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4楼2018-03-20 13:34:27
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Drm_o

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by *………* at 2018-03-20 13:34:27
我也做噬菌体  不过我在噬菌体核酸提取后   发现每次提取的条带都不亮  这的怎么办呀  能一起交流一下嘛
...

噬菌体量不够？

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5楼2018-12-18 22:33:01
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