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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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Drm_o

新虫 (小有名气)

[求助] 噬菌体空斑实验以及PEG沉淀收集病毒

f2噬菌体,大肠杆菌285宿主菌
将噬菌体加入pH等于10的介质中,进行空斑实验
结果原液出现下边这种情况:


但梯度稀释后-1,-2剃度空斑均匀分布,长得很好,想问下,这是因为高pH杀死了宿主菌,还是杀死了噬菌体或者让噬菌体聚团了啊


接下来就是PEG6000,13%的比例加进含有噬菌体的溶液里,10000r,4℃条件下离心30min取沉淀冲悬后,噬菌体回收效率特别低,而且没有完全沉淀,上清液中仍然含有噬菌体,想请教下这是什么原因,怎样做可以提高回收率啊?

最近一直被这些问题困扰,感觉快崩溃了,求助大神!

噬菌体空斑实验以及PEG沉淀收集病毒


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qidem

铁虫 (小有名气)

2楼2017-09-25 21:08:31
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liu_y

铜虫 (初入文坛)

加入PEG之后一般都是4度静置1小时左右吧,楼主实验时没有静置这一步吗?
3楼2017-10-28 21:02:51
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*………*

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
1楼: Originally posted by Drm_o at 2017-09-21 11:51:02
f2噬菌体,大肠杆菌285宿主菌
将噬菌体加入pH等于10的介质中,进行空斑实验
结果原液出现下边这种情况:
但梯度稀释后-1,-2剃度空斑均匀分布,长得很好,想问下,这是因为高pH杀死了宿主菌,还是杀死了噬菌体或者 ...

我也做噬菌体  不过我在噬菌体核酸提取后   发现每次提取的条带都不亮  这的怎么办呀  能一起交流一下嘛

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4楼2018-03-20 13:34:27
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Drm_o

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by *………* at 2018-03-20 13:34:27
我也做噬菌体  不过我在噬菌体核酸提取后   发现每次提取的条带都不亮  这的怎么办呀  能一起交流一下嘛
...

噬菌体量不够?

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5楼2018-12-18 22:33:01
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