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有人用pBAD质粒做重组蛋白表达的吗?求大神
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SherHolmes
新虫
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虫号: 7080808
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性别: GG
专业: 食品科学基础
[交流]
有人用pBAD质粒做重组蛋白表达的吗?求大神
已有2人参与
用pBAD质粒做重组蛋白,,用的是阿拉伯糖诱导,终浓度2mg/mL,培养3h开始加阿拉伯糖,诱导4h,粗蛋白浓度还行,用咪唑过His柱,没有蛋白了,感觉蛋白没有挂柱子上一样,求大神指教
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1楼
2017-09-21 00:04:44
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sangsandra
金虫
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虫号: 439771
注册: 2007-10-21
性别:
MM
专业: 环境微生物学
请问你在什么菌株中进行表达的?我用的TOP10一直没有表达
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4楼
2022-05-13 15:15:14
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18109408758
新虫
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注册: 2016-08-15
专业: 微生物学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
多少度诱导的,我的我一直感觉是没表达呢,我是OD到0.6-0.8加的称好的阿拉伯糖固体,25℃诱导10个小时,破碎感觉没表达,请问一下你的操作。
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2楼
2019-06-26 15:47:07
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sangsandra
金虫
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虫号: 439771
注册: 2007-10-21
性别:
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专业: 环境微生物学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
18109408758
at 2019-06-26 15:47:07
多少度诱导的,我的我一直感觉是没表达呢,我是OD到0.6-0.8加的称好的阿拉伯糖固体,25℃诱导10个小时,破碎感觉没表达,请问一下你的操作。
请问你后来用pBAD,蛋白表达了吗?
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3楼
2022-05-13 15:13:58
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