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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 有人用pBAD质粒做重组蛋白表达的吗？求大神
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SherHolmes

新虫 (小有名气)

[交流] 有人用pBAD质粒做重组蛋白表达的吗？求大神 已有2人参与

用pBAD质粒做重组蛋白，，用的是阿拉伯糖诱导，终浓度2mg/mL，培养3h开始加阿拉伯糖，诱导4h，粗蛋白浓度还行，用咪唑过His柱，没有蛋白了，感觉蛋白没有挂柱子上一样，求大神指教

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1楼 2017-09-21 00:04:44
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18109408758

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
多少度诱导的，我的我一直感觉是没表达呢，我是OD到0.6-0.8加的称好的阿拉伯糖固体，25℃诱导10个小时，破碎感觉没表达，请问一下你的操作。

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2楼2019-06-26 15:47:07
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sangsandra

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 18109408758 at 2019-06-26 15:47:07
多少度诱导的，我的我一直感觉是没表达呢，我是OD到0.6-0.8加的称好的阿拉伯糖固体，25℃诱导10个小时，破碎感觉没表达，请问一下你的操作。

请问你后来用pBAD，蛋白表达了吗？
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3楼2022-05-13 15:13:58
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sangsandra

金虫 (正式写手)
请问你在什么菌株中进行表达的？我用的TOP10一直没有表达
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4楼2022-05-13 15:15:14
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