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luck12345678

新虫 (小有名气)

[求助] 连接超表达载体后,转化大肠杆菌总是没有阳性克隆怎么回事? 已有1人参与

大哥大姐们,我最近做了两次酶切连接转化大肠杆菌了,挑菌时总是没有阳性克隆,,,,酶切也切出来了,连接也出来了,可是就是转化后没有阳性克隆怎么回事,求帮助求指点。。。。。图分别是酶切后,连接后,跟转化后菌液pcr

连接超表达载体后,转化大肠杆菌总是没有阳性克隆怎么回事?


连接超表达载体后,转化大肠杆菌总是没有阳性克隆怎么回事?-1


连接超表达载体后,转化大肠杆菌总是没有阳性克隆怎么回事?-2


@wizardfan @wizardfan 发自小木虫Android客户端
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涯天一方

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by mlxmiao at 2017-09-20 14:19:34
那就是没有连上。载体片段与目的片段加大浓度和时间。还不行,换个方法,如融合
...

您好,我最近也是做过表达,普通连接,转化后第二天不长菌,第三天会长出密密麻麻的小菌,验证后不对。用融合的方法做了,还是出现同样的问题,这是什么问题呢
9楼2017-09-23 20:13:20
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luck12345678

新虫 (小有名气)

2楼2017-09-20 08:37:01
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luck12345678

新虫 (小有名气)

3楼2017-09-20 08:37:39
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luck12345678

新虫 (小有名气)

4楼2017-09-20 08:37:58
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