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你好先生121

铁虫 (小有名气)

[求助] 耐药质粒 已有1人参与

有没有人可以讲解一下一个问题,最近对一株多重耐药的大肠杆菌提质粒后,随机用双酶切切质粒,切出来了许多小片段,导师说让我把小片段胶回收后克隆,但是克隆转化后,长出了菌落,摇菌也能浑浊,但是用耐药基因引物扩增却没有条带,不知什么原因,有谁可以讲解啊,谢谢啦。。。。急等
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简简单单
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你好先生121

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by snoopytbw at 2017-09-19 11:22:12
小片段克隆后的产物,你用原来的耐药基因引物来PCR肯定P不出来啊,你想想,目标片段都是小片段,原PCR引物的靶点序列不一定就在你的小片段上呀。要PCR的话需要设计该小片段的引物才行。

好的,万分感谢
简简单单
3楼2017-09-19 16:55:40
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
小片段克隆后的产物,你用原来的耐药基因引物来PCR肯定P不出来啊,你想想,目标片段都是小片段,原PCR引物的靶点序列不一定就在你的小片段上呀。要PCR的话需要设计该小片段的引物才行。
2楼2017-09-19 11:22:12
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shenglong00

铜虫 (小有名气)

模板被你切成小片段,你的引物没在模板范围内了吧

发自小木虫Android客户端
仰天大笑出门去,我等岂是蓬蒿人
4楼2017-10-12 15:18:07
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WRU123

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by snoopytbw at 2017-09-19 11:22:12
小片段克隆后的产物,你用原来的耐药基因引物来PCR肯定P不出来啊,你想想,目标片段都是小片段,原PCR引物的靶点序列不一定就在你的小片段上呀。要PCR的话需要设计该小片段的引物才行。

说的是

发自小木虫IOS客户端
5楼2017-11-12 07:18:35
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