应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 耐药质粒
61/1返回列表
查看: 877  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

你好先生121

铁虫 (小有名气)

[求助] 耐药质粒 已有1人参与

有没有人可以讲解一下一个问题，最近对一株多重耐药的大肠杆菌提质粒后，随机用双酶切切质粒，切出来了许多小片段，导师说让我把小片段胶回收后克隆，但是克隆转化后，长出了菌落，摇菌也能浑浊，但是用耐药基因引物扩增却没有条带，不知什么原因，有谁可以讲解啊，谢谢啦。。。。急等
回复此楼

» 猜你喜欢
简简单单
1楼 2017-09-18 23:07:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
小片段克隆后的产物，你用原来的耐药基因引物来PCR肯定P不出来啊，你想想，目标片段都是小片段，原PCR引物的靶点序列不一定就在你的小片段上呀。要PCR的话需要设计该小片段的引物才行。
赞一下 回复此楼
2楼2017-09-19 11:22:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

你好先生121

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by snoopytbw at 2017-09-19 11:22:12
小片段克隆后的产物，你用原来的耐药基因引物来PCR肯定P不出来啊，你想想，目标片段都是小片段，原PCR引物的靶点序列不一定就在你的小片段上呀。要PCR的话需要设计该小片段的引物才行。

好的，万分感谢
回复此楼
简简单单
3楼2017-09-19 16:55:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenglong00

铜虫 (小有名气)
模板被你切成小片段，你的引物没在模板范围内了吧

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
仰天大笑出门去，我等岂是蓬蒿人
4楼2017-10-12 15:18:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WRU123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by snoopytbw at 2017-09-19 11:22:12
小片段克隆后的产物，你用原来的耐药基因引物来PCR肯定P不出来啊，你想想，目标片段都是小片段，原PCR引物的靶点序列不一定就在你的小片段上呀。要PCR的话需要设计该小片段的引物才行。

说的是

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
5楼2017-11-12 07:18:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WRU123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by 你好先生121 at 2017-09-18 23:07:47
有没有人可以讲解一下一个问题，最近对一株多重耐药的大肠杆菌提质粒后，随机用双酶切切质粒，切出来了许多小片段，导师说让我把小片段胶回收后克隆，但是克隆转化后，长出了菌落，摇菌也能浑浊，但是用耐药基因引物 ...

瓜娃子，跑什么PCR？直接送出去测序不就完事了

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
6楼2017-11-12 07:19:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 你好先生121 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +5 瞬息宇宙 2026-08-12 5/250 2026-08-13 07:13 by athenadai219
[基金申请] FileCode能看出啥？ +8 要乐观耀哥 2026-08-10 23/1150 2026-08-13 00:35 by 要乐观耀哥
[基金申请] 不应该看fileCode +5 且听虎啸 2026-08-12 6/300 2026-08-12 16:26 by Tide man
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭