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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 大肠杆菌感受态出了问题诚心请教诸位（回帖者每个奖励2个金币请版主帮忙奖励谢谢）
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qianliu_ln

新虫 (初入文坛)
很明显是菌种退化了，你要做的是菌种复壮啊！！

我一般就是在37度下多摇几次菌，比如12小时接种一次，接种的时候少加一点菌种，比如你最开始是按1%，那么后边的就渐渐减少，这样菌种的生长能力就会越来越强，等复壮好了，你再做感受态就会比较好了。另外，复壮好的菌多保存几管，以后用的时候就从这里边拿，就会保持比较好的生长速度啦。
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31楼2009-03-03 17:37:20
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wwwttt179

铁虫 (初入文坛)
我觉得是菌的传代次数太多了
取原菌试一试
也有可能是连接试剂盒的问题
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32楼2009-04-03 17:40:44
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anik

银虫 (正式写手)
是不是菌种老化了阿。。。。
重新换个试试
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33楼2009-04-03 17:58:32
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xiaomu3811

金虫 (小有名气)
应该用保存于-70的原始菌种来做感受态
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34楼2009-04-03 21:34:57
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Alexis

铜虫 (小有名气)
可以买一管感受态用作种子制作新的感受态，感受态非常重要，好的话一遍成功，还是做个好用的吧
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35楼2009-04-03 22:27:07
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aga0110125

银虫 (小有名气)
自己做感受态也就几块钱一支封顶，公司卖得钱全花在运输上了
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36楼2009-04-07 15:03:42
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小猫三两只

金虫 (正式写手)
重新制一下感受态,时间长了可能就失活了
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37楼2009-04-08 09:30:04
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8659

银虫 (小有名气)
建议涂布一下 挑单菌落液体培养 在扩培试试 一般都可以
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38楼2009-04-08 21:42:55
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yaoguizhe

铁虫 (初入文坛)
重新做感受态吧，TSS法效果不错，还挺简单的
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39楼2009-04-09 09:50:47
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dengyougu

木虫 (小有名气)
你的感受态是买的还是从别人哪里拿的或是自己做的？建议还是去买吧，天根的是1000ml130元，价格不算贵，而且我用这个做了，转化效率还不错，只是我总是质粒连接有问题，也就是酶切的酶还没找到最好的实验条件或最好的酶，在这一步上也做了很长时间，现在还停留在这里，但愿我们都早点做成功。
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40楼2009-04-12 08:39:44
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