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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 大肠杆菌感受态出了问题诚心请教诸位（回帖者每个奖励2个金币请版主帮忙奖励谢谢）
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wuchuqiu

铁虫 (小有名气)
★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论，欢迎常来~ 2-19 12:51
建议你重新划平板复壮菌株，在挑取单菌落培养，用试剂公司的高效感受态细胞制备试剂盒制作，很便宜，一次可以做很多，我就是这么干的。
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21楼2009-02-19 11:22:59
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fenghaizai

金虫 (小有名气)
自己做感受态，效果好又便宜，比买的好，买的在运输过程中的损失很大
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22楼2009-02-19 11:33:03
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)
换一只甘油管的菌株吧，重新做感受态！
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23楼2009-02-19 15:26:49
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sunqx

木虫 (著名写手)
是不是感受态都冻死了？最后加甘油了吗
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24楼2009-02-19 20:50:06
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hiking8715

金虫 (小有名气)
诸位师兄师姐做转化37培养的时候大约多长时间长菌啊，我的12小时了怎么啥都没有呢，还有以前的时候转化后只要二三十个克隆，哥哥姐姐们有知道的吗？？？
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25楼2009-02-20 09:02:07
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)
37度培养如果是克隆的话大概16个小时就可以看到菌了，12个小时可能能看到一点点或者看不到吧。
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26楼2009-02-20 15:35:01
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holy518125

金虫 (小有名气)
个人认为解决的方案如下：
1.请确定是感受态出了问题，在其他方面没有问题，如转化的温度，个人就曾经犯过一直以为是细胞有问题了，最好发现是水浴锅的温度计坏了。
2.进行比较试验：使用别人的感受态是不是得到的相同的结果？如是，请从别的方面在入手分析；如不是可以认为是感受态的问题。
3.自己做感受态的时候是否操作规范。
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27楼2009-02-22 18:46:28
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jjswlg

铜虫 (小有名气)
于是将DH5a涂平板后调取单斑培养后将菌液保存于-20度一个月左右后取出转接培养15个小时左右，然后转接培养2个半小时，再用质粒进行转化？

呵呵 是不是表达错了

应该是感受态的问题了
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28楼2009-03-01 16:54:06
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ypt86

铁虫 (初入文坛)
质粒转进去了吗？
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29楼2009-03-03 14:04:07
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bingdong05

银虫 (正式写手)
感觉是感受态的问题，以前遇到过同样的问题，当时快被搞死了，所有可能原因排除后，最后没办法又重新复壮的大肠杆菌，重新做的感受态，结果还可以。建议楼主复壮后重新做
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30楼2009-03-03 15:24:42
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