24小时热门版块排行榜    

查看: 1938  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wuhao4850103

银虫 (著名写手)

[求助] 用NanoDrop测蛋白酶解以后的多肽含量,结果偏大 已有1人参与

本人最近用胰蛋白酶酶解蛋白,然后用C18脱盐柱对产物脱盐,最后用NanoDrop测定多肽含量,但是测定的结果非常大,已经达到8mg/ml左右,远远大于实际值,实际上按照酶解蛋白量以及溶液体积来计算,应该还不到1mg/ml。所以估计溶液里面应该有其他干扰成分,所以才使得测量值偏大,想请问用NanoDrop测定多肽含量时,什么样的干扰成分会导致测量结果偏大?
回复此楼
嘻嘻哈哈
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhao4850103

银虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by zhjzhou at 2020-03-19 10:35:52
楼主现在用Nanodrop测蛋白酶解的多肽,有好的参照了吗?比方说OD260/280的值一般在哪个区间,样品纯度是比较高的,怎样评价多肽样品的质量?谢谢!

现在测定多肽含量可以使用多肽测定试剂盒,我最近用的是赛默飞厂家的Pierce Quantitative多肽浓度测定试剂盒,
嘻嘻哈哈
7楼2020-08-20 18:40:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

biotpack2

捐助贵宾 (小有名气)


溶液中的去污剂等对测定的准确性有着较大的影响,建议blank最好使用提纯蛋白的溶液。
2楼2017-09-11 12:04:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fafu2011915

铜虫 (初入文坛)

你除盐之后是直接测定吗?还是把除盐之后的溶液冻干成粉末之后再测定的?
3楼2017-09-11 14:13:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhao4850103

银虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fafu2011915 at 2017-09-11 14:13:51
你除盐之后是直接测定吗?还是把除盐之后的溶液冻干成粉末之后再测定的?

除盐过程中测定的,当时将蛋白酶解溶液过C18脱盐柱,酶解产物按理来说应该都吸附在C18柱上面,流出液里面的酶解产物应该很少,当时为了检验一下脱盐柱的效果,将这些流出液拿去用NanoDrop测了一下多肽含量,但是测量值特别高。
嘻嘻哈哈
4楼2017-09-11 19:41:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 5/250 2026-09-02 22:50 by rM1TE0WVDIIY
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 3/150 2026-09-02 22:50 by rM1TE0WVDIIY
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +14 Kittylucky 2026-08-27 15/750 2026-09-02 19:35 by liumei0601
[基金申请] 要骂人了,新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西,结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
信息提示
请填处理意见