应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 用NanoDrop测蛋白酶解以后的多肽含量，结果偏大
71/1返回列表
查看: 1719  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wuhao4850103

银虫 (著名写手)

[求助] 用NanoDrop测蛋白酶解以后的多肽含量，结果偏大 已有1人参与

本人最近用胰蛋白酶酶解蛋白，然后用C18脱盐柱对产物脱盐，最后用NanoDrop测定多肽含量，但是测定的结果非常大，已经达到8mg/ml左右，远远大于实际值，实际上按照酶解蛋白量以及溶液体积来计算，应该还不到1mg/ml。所以估计溶液里面应该有其他干扰成分，所以才使得测量值偏大，想请问用NanoDrop测定多肽含量时，什么样的干扰成分会导致测量结果偏大？
回复此楼

» 猜你喜欢
嘻嘻哈哈
1楼 2017-09-10 19:43:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biotpack2

捐助贵宾 (小有名气)
溶液中的去污剂等对测定的准确性有着较大的影响，建议blank最好使用提纯蛋白的溶液。
赞一下 回复此楼
2楼2017-09-11 12:04:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fafu2011915

铜虫 (初入文坛)
你除盐之后是直接测定吗？还是把除盐之后的溶液冻干成粉末之后再测定的？
赞一下 回复此楼
3楼2017-09-11 14:13:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhao4850103

银虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by fafu2011915 at 2017-09-11 14:13:51
你除盐之后是直接测定吗？还是把除盐之后的溶液冻干成粉末之后再测定的？

除盐过程中测定的，当时将蛋白酶解溶液过C18脱盐柱，酶解产物按理来说应该都吸附在C18柱上面，流出液里面的酶解产物应该很少，当时为了检验一下脱盐柱的效果，将这些流出液拿去用NanoDrop测了一下多肽含量，但是测量值特别高。
赞一下 回复此楼
嘻嘻哈哈
4楼2017-09-11 19:41:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhao4850103

银虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biotpack2 at 2017-09-11 12:04:44
溶液中的去污剂等对测定的准确性有着较大的影响，建议blank最好使用提纯蛋白的溶液。

当时顺便看了一下A260/A280比值，非常高，都超过1了。
赞一下 回复此楼
嘻嘻哈哈
5楼2017-09-11 19:43:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhjzhou

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wuhao4850103: 金币+5, ★★★很有帮助 2020-08-20 18:37:49
楼主现在用Nanodrop测蛋白酶解的多肽，有好的参照了吗？比方说OD260/280的值一般在哪个区间，样品纯度是比较高的，怎样评价多肽样品的质量？谢谢！
赞一下 回复此楼
6楼2020-03-19 10:35:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhao4850103

银虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zhjzhou at 2020-03-19 10:35:52
楼主现在用Nanodrop测蛋白酶解的多肽，有好的参照了吗？比方说OD260/280的值一般在哪个区间，样品纯度是比较高的，怎样评价多肽样品的质量？谢谢！

现在测定多肽含量可以使用多肽测定试剂盒，我最近用的是赛默飞厂家的Pierce Quantitative多肽浓度测定试剂盒，
赞一下 回复此楼
嘻嘻哈哈
7楼2020-08-20 18:40:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wuhao4850103 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-18 6/300 2026-03-22 20:18 by edmund7
[考研] 一志愿中南化学（0703）总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 化学调剂 +5 yzysaa 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:12 by peike
[考研] 0805 316求调剂 +3 大雪深藏 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:55 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 278求调剂 +9 烟火先于春 2026-03-17 9/450 2026-03-21 17:47 by 学员8dgXkO
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 070300化学319求调剂 +7 锦鲤0909 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:46 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +3 Jack?k?y 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:17 by JourneyLucky
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕，总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 材料专业求调剂 +6 hanamiko 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:24 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂，总分315（英一） +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭