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zyfskj新虫 (著名写手)
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关于反转录与qpcr问题请教
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请问，在做相对荧光定量的时候，要调整不同的cDNA模板的浓度还是一开始做反转录的时候把RNA调成同一浓度更有意义？我一开始做反转录的时候，因为没有调RNA 浓度到一致，后面又直接10倍稀释法做了引物的标准曲线，所以，想着测样品的时候把cDNA浓度调成一致。但是，特别麻烦，而且我发现我的cDNA的260/280为1.5左右，不明白为啥会这样，我同学是直接反转录的时候RNA 都用1微克，因为我的RNA 每次提的浓度不超过100，甚至十几的样子，链霉菌的RNA 不好提。所以就没有统一浓度，，。现在做qpcr感觉超级麻烦的不得了，，调整cDNA 可真不好做，，想问一下大家都怎么做的，可以详细指点一下么？？？ 发自小木虫IOS客户端 |
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