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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助：电泳出来的条带很奇怪，求解！！
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upwardkl

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助：电泳出来的条带很奇怪，求解！！ 已有2人参与

求助：在我的电泳图中，为检测我的目的基因在不同组织模板中的表达情况，，，不同的模板应为唯一的变量，，，但条带形状不一，，不知可能是那些原因导致的呢？？

模板本身已经过GAPDH检测，显示正常
？？
反应体系
PCR过程
胶的浓度
电泳缓冲液，电泳的电压
电泳的染色液等？？？
什么原因的可能性最大哦？？

请求帮助和指导！
谢谢！

求助：电泳出来的条带很奇怪，求解！！
1.png


求助：电泳出来的条带很奇怪，求解！！-1
2.png
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雪霁花开，向上追求
1楼 2017-09-02 11:23:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

petty04

新虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-02 22:29:57
你的marker条带似乎也不够尖锐，看看你的跑胶buffer是否浓度太高了
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2楼2017-09-02 12:56:39
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upwardkl

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by petty04 at 2017-09-02 12:56:39
你的marker条带似乎也不够尖锐，看看你的跑胶buffer是否浓度太高了

嗯嗯，是10ul的加样体系，加了1ul的buffer（含Mg离子）？？？？
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雪霁花开，向上追求
3楼2017-09-02 14:51:21
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yangmeng0711

新虫 (小有名气)
TAE是否有问题？

发自小木虫IOS客户端
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4楼2017-09-02 14:57:45
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upwardkl

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yangmeng0711 at 2017-09-02 14:57:45
TAE是否有问题？

我该肿么判断TAE是否有问题呢？
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雪霁花开，向上追求
5楼2017-09-02 15:52:20
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能量车gogogo

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-02 22:30:11
可能电压不稳定。
要是电压太低，造成跑胶的时间过长，缓冲液的温度升高，样品条带就可能这样了，明显是样品已经弥散了。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

upwardkl
人不会永远十七岁，但永远有人十七岁
6楼2017-09-02 16:27:32
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yangmeng0711

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by upwardkl at 2017-09-02 15:52:20
我该肿么判断TAE是否有问题呢？...

从新配，比例别搞错了

发自小木虫IOS客户端
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7楼2017-09-02 18:03:16
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upwardkl

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 能量车gogogo at 2017-09-02 16:27:32
可能电压不稳定。
要是电压太低，造成跑胶的时间过长，缓冲液的温度升高，样品条带就可能这样了，明显是样品已经弥散了。

您好！我想再问下，那适合的电压一般是多少？，，时间一般是多久为好？？
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雪霁花开，向上追求
8楼2017-09-02 19:04:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

upwardkl

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yangmeng0711 at 2017-09-02 18:03:16
从新配，比例别搞错了
...

我想再请问一下，您说的比例，是指胶的，还是PCR反应体系的哦？或是其他的哦？
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雪霁花开，向上追求
9楼2017-09-02 19:05:57
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upwardkl

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yangmeng0711 at 2017-09-02 14:57:45
TAE是否有问题？

应该没有问题的，
回复此楼
雪霁花开，向上追求
10楼2017-09-02 19:06:25
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